[发明专利]一种机械分离毛囊干细胞的方法

权利要求书

1.一种机械分离毛囊干细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（S.1）从皮肤样本取出毛囊组织，加入组织保护液进行清洗；

（S.2）取步骤（S.1）中清洗后的毛囊组织浸泡在组织保护液内并进行剪切，除去清洗后的毛囊组织的皮下脂肪及杂物，得到毛囊组织块；

（S.3）取步骤（S.2）中得到的毛囊组织块进行机械分离，加入组织保护液混匀；然后离心，去除上清，得到毛囊干细胞沉淀；加入复方电解质液重悬毛囊干细胞沉淀，收集得到毛囊干细胞悬液；

所述步骤（S.2）以及步骤（S.3）中的组织保护液中包含有白蛋白。

2.根据权利要求1所述的一种机械分离毛囊干细胞的方法，其特征在于，所述组织保护液中还包括复方电解质液。

3.根据权利要求2所述的一种机械分离毛囊干细胞的方法，其特征在于，所述白蛋白的浓度为0.1%~5%。

4.根据权利要求1所述的一种机械分离毛囊干细胞的方法，其特征在于，所述步骤（S.2）中剪切的具体步骤如下：

在4~18℃无菌环境下，取步骤（S.1）中清洗后的毛囊组织浸泡在组织保护液内并剪切成条状，除去清洗后的毛囊组织的皮下脂肪及杂物，得到毛囊组织块。

5.根据权利要求1所述的一种机械分离毛囊干细胞的方法，其特征在于，所述步骤（S.3）中机械分离的步骤如下：

取步骤（S.2）中得到的毛囊组织块进行研磨分解、过滤，收集得到含毛囊干细胞的细胞混合物。

6.根据权利要求5所述的一种机械分离毛囊干细胞的方法，其特征在于，所述步骤（S.3）中机械分离的具体步骤如下：

在4~18℃无菌环境下，取步骤（S.2）中得到的毛囊组织块置于研磨器械内以60~150r/min进行匀速研磨分解0.5~3min并通过研磨器械内的过滤膜片进行分离，收集得到含毛囊干细胞的细胞混合物。

7.根据权利要求5或6所述的一种机械分离毛囊干细胞的方法，其特征在于，所述步骤（S.3）中得到毛囊干细胞悬液的具体步骤如下：

取步骤（S.2）中得到的毛囊组织块进行研磨分解、过滤，收集得到含毛囊干细胞的细胞混合物；加入组织保护液混合均匀，收集得到细胞悬液；然后离心，去除上清，得到毛囊干细胞沉淀；加入复方电解质液重悬毛囊干细胞沉淀，收集得到毛囊干细胞悬液。

8.根据权利要求1所述的一种机械分离毛囊干细胞的方法，其特征在于，所述步骤（S.3）中机械分离的步骤如下：

取步骤（S.2）中得到的毛囊组织块进行离心分解，收集得到含毛囊干细胞的组织块混合物。

9.根据权利要求8所述的一种机械分离毛囊干细胞的方法，其特征在于，所述步骤（S.3）中得到毛囊干细胞悬液的具体步骤如下：

取步骤（S.2）中得到的毛囊组织块进行离心分解，收集得到含毛囊干细胞的组织块混合物；加入组织保护液混合均匀，收集得到细胞悬液与组织块的混合物；然后离心，去除上清，得到毛囊干细胞沉淀；加入复方电解质液重悬毛囊干细胞沉淀，经细胞滤网过滤，收集滤液得到毛囊干细胞悬液。

10.根据权利要求1所述的一种机械分离毛囊干细胞的方法，其特征在于，所述步骤（S.3）中组织保护液的添加量为1~50mL，复方电解质液的添加量为1~5mL。