[发明专利]一组用于评估非小细胞肺癌风险的血浆miRNA标志物及其筛选方法和应用

说明书

本发明提供了一组用于评估非小细胞肺癌风险的血浆miRNA标志物及其筛选方法和应用，所述血浆miRNA标志物包括miR‑205‑5p、miR‑206、miR‑4732‑3p、miR‑4732‑5p和miR‑12136中的任意一种或者五种组合，通过检测该miRNA组合中各miRNAs的血浆表达水平来评估非小细胞肺癌风险。本发明基于血浆miRNAs的无创的评估非小细胞肺癌风险的方法，在肺腺癌和肺鳞癌、早期和晚期非小细胞肺癌中均具有良好的预测价值，为非小细胞肺癌的风险评估提供了重要价值。

技术领域

本发明属于生物医学领域，具体是一组用于评估非小细胞肺癌风险的血浆miRNA标志物及其筛选方法和应用。

背景技术

肺癌是世界范围内发病率和死亡率最高的恶性肿瘤。肺癌早期病情隐匿，通常无任何症状，但大部分患者在初诊时已处于中晚期，失去了手术切除的机会。晚期肺癌患者的五年生存率不足5％，而早期肺癌患者的五年生存率可达90％以上。因此，早期诊断是肺癌患者获得良好预后的一个重要机会。

目前，肺癌的早期诊断方法有胸部影像学、支气管镜检技术以及痰脱落细胞学检测等，但这些方法的检测效果均不理想。据报道，在肺癌早期筛查和诊断中广泛应用的LDCT技术，其检测产生的假阳性可高达21％以上。因此，单独利用影像学方法很难准确诊断早期肺癌，尚缺乏有效的生物标志物结合影像学技术(LDCT)来提高早期肺癌诊断的特异性。

非小细胞肺癌占肺癌全部肺癌的80％，其主要病理分型包括肺腺癌(60％)和肺鳞癌(30-35％)。非小细胞肺癌的生存率与肿瘤分期关系密切，在非小细胞肺癌发生早期阶段发现能显著提高其生存率。然而目前用来预测并发现肺癌的方法大部分存在侵入性、低灵敏度、有辐射等局限性，且识别早期肺癌的能力有限。近年来对于分子生物标志物的相关研究为肺癌的识别和风险预测提供了新的方向。

miRNA是长度～22个核苷酸的非编码小RNA，通过种子序列(5’端第2-8位核苷酸)识别靶基因(特别是mRNA)的3’非翻译区域的互补结合位点发挥作用。miRNA作用方式主要包括三种：转录、抑制与mRNA的切割或降解。miRNA可以在不改变DNA序列的情况下，调控转录后mRNA水平及蛋白质稳定性，改变肿瘤表观遗传学特征，参与恶性肿瘤的发生发展，有望成为恶性肿瘤早期诊断的生物标志物。

发明内容

针对上述现有技术的不足，本发明公开一组用于评估非小细胞肺癌风险的血浆miRNA标志物及其筛选方法和应用，基于对5种miRNA的血浆表达水平的检测，miRNA标志物组合对肺癌发生具有良好的预测价值，可以作为肺癌风险评估的生物标志物。

本发明提供的技术方案：一组用于评估非小细胞肺癌风险的血浆miRNA标志物，包括miR-205-5p、miR-206、miR-4732-3p、miR-4732-5p和miR-12136中的任意一种或者五种组合。

进一步的，所述的血浆miRNA标志物在制备用于非小细胞肺癌患病评估的miRNA标志物检测试剂中的应用。

进一步的，所述的血浆miRNA标志物在制备用于非小细胞肺癌患病评估的试剂盒中的应用。

一组用于评估非小细胞肺癌风险的血浆miRNA标志物组合的筛选方法，包括以下步骤：