[发明专利]用于鉴定睡莲品种或检测睡莲种质资源遗传多样性的SRAP分子标记引物组及其应用

权利要求书

1.用于鉴定睡莲品种和/或检测睡莲种质资源遗传多样性的SRAP分子标记引物组，其特征在于，所述引物组包括以下组合：Em1-Me12、Em2-Me12、Em2-Me15、Em8-Me12、Em8-Me13、Em8-Me14、Em8-Me10、Em9-Me12、Em9-Me15和Em10-Me14；

所述Em1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述Em2的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示：所述Em8的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述Em9的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；所述Em10的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示；所述Me10的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；所述Me12的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示；所述Me13的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示；所述Me14的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示；所述Me15的核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示。

2.一种用于鉴定睡莲品种和/或检测睡莲种质资源遗传多样性的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1所述SRAP分子标记引物组。

3.根据权利要求2所述试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括PCRMix和去离子水。

4.权利要求1所述SRAP分子标记引物组或权利要求2或3所述试剂盒在鉴定睡莲品种和/或检测睡莲种质资源遗传多样性中的应用。

5.一种检测睡莲种质资源遗传多样性的方法，其特征在于，包括以下步骤：

以待测样品的DNA为模板DNA，以权利要求1所述SRAP分子标记引物组对所述模板DNA进行PCR扩增，将扩增产物进行电泳，PCR扩增产物在相同迁移率位置上有DNA条带记为1，无DNA条带记为0，形成SRAP的0/1数据矩阵，利用所述0/1数据矩阵，在NTSYS软件中计算样品间的遗传距离，并由NTSYS软件对所得计算样品间的遗传距离进行聚类分析。

6.根据权利要求5所述方法，其特征在于，所述PCR扩增的反应程序包括：94℃预变性2min；第一次PCR：94℃变性40s，36℃复性40s，72℃延伸80s，5个循环；第二次PCR：94℃变性40s，56℃退火40s，72℃延伸80s，36个循环，72℃延伸10min。

7.根据权利要求6所述方法，其特征在于，所述PCR扩增的反应体系以20μL计，包括模板DNA 2μL、所述SRAP分子标记引物组中每个组合的引物各0.5μL、PCR Mix 10μL和ddH₂O 7μL。

8.根据权利要求7所述方法，其特征在于，所述引物的浓度均为20μmol/L；所述模板DNA的浓度为50ng/μL。

9.根据权利要求5所述方法，其特征在于，所述待测样品包括睡莲的叶片。

10.根据权利要求9所述方法，其特征在于，所述睡莲的品种包括红宝石、赤子心、蓝宝石、N.Aleci、天之蓝、卵叶睡莲、丹泉石、桑给巴尔之星、狐火、岩山千瓣、天堂、紫云、苏皖那、金色光环、艾伯特、银河系、奇拉格、黄上蓝、莫达拉湾、蓝蟹爪、伊斯兰达、烟绿、斑叶蓝蟹爪、伊丽莎、蓝女士、黄蟹爪、米努它、烟火、公牛眼、雪崩、哈芬根、酸橙、暹罗玉、甘颂文、血色火焰、粉钻、粉色好望角、多丽丝、科罗拉多、斑叶红蟹爪、红色重瓣蟹爪、芭芭拉、蓝色好望角、新苏、热带风情、奥斯塔、迈阿密玫瑰、杰伦萨普、仲克尼、小花、锦黄、粉色烈鸟、蓝紫苑、蓝染、林西伍德、泰王、黄金国、纯真、玛丽安、黑美人、拉萨米、紫乔伊、卡奔、白巨、红IM、紫IM、凯斯隆、Tuonta、白IM、流苏、万维莎、绝色佳人、白千瓣、马哈巴颂、黄西瓜、山莓、艳阳、暹罗幸运、佛琴娜丽丝、小白子午莲、雪白睡莲、夹克粉、白睡莲、霍兰迪亚、诗丽吉皇后、暹罗粉1、暹罗紫1、英国红、红色闪耀、印度红、泰国粉、喀麦隆、埃及白、安塔利亚、小雪夜、秘鲁睡莲、变色澳洲、白蓝星、越南原生、印度延药、优雅睡莲、埃及蓝、美洲白睡莲、美洲白睡莲红叶、蓝星睡莲、海南延药、非洲延药、花胎生、粉巨、科曼契、墨西哥黄和黄乔伊中的至少两种。