[发明专利]一种微交联透明质酸钠-重组胶原蛋白复合凝胶及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种微交联透明质酸钠‑重组胶原蛋白复合凝胶及其制备方法和应用，微交联透明质酸钠‑重组胶原蛋白复合凝胶通过酶抑制剂与透明质酸钠和重组胶原蛋白形成相互作用，形成微交联复合凝胶，起到填充效果。通过酶抑制剂抵抗透明质酸酶或胶原蛋白酶的降解和抗氧化剂自由基清除能力，延长凝胶作用时间；同时，透明质酸钠的保湿补水效果和重组胶原蛋白的修复效果协同作用，使其在医疗美容领域具有良好应用前景和经济价值；该微交联透明质酸钠‑重组胶原蛋白复合凝胶适用于真皮组织浅层到中层注射填充，以纠正皮肤皱纹凹陷。

技术领域

本发明属于生物医用材料制备技术领域，涉及一种微交联透明质酸钠-重组胶原蛋白复合凝胶及其制备方法和应用。

背景技术

受到机体内源性老化和紫外线、环境污染等外界环境因素的影响，皮肤会随着时间逐渐衰老。皮肤衰老的外在表现为皮肤变薄、干燥、皱纹、下垂、色素沉着等。随着年龄的增加，皮肤中胶原蛋白、弹性蛋白和透明质酸合成能力下降。皮肤老化在很大程度上可归因于真皮成纤维细胞功能障碍及其生物合成活性的降低。因此，通过注射透明质酸钠、胶原蛋白、抗氧化剂等物质，为成纤维细胞提供更好的微环境以及抵抗氧化应激作用，进而改善皮肤状态，延缓皮肤衰老。

目前市场上的产品多以透明质酸钠为主。透明质酸是一种非硫酸化的糖胺聚糖长链聚合物，没有物种特异性，注射前无需皮试，具有柔软、稳定、生物兼容性好等特点，易于注射及保持形态，且不与局部细胞结合及无炎症反应。透明质酸具有极强的锁水功能，可结合自身重量约1000倍的水分，当注射至皮肤真皮层，能够快速充盈皮肤组织，产生美容效果。但是，透明质酸在皮肤内的半衰期非常短。在透明质酸酶的作用下，长链的透明质酸被快速降解成小分子片段，然后进入循环系统，被代谢吸收。透明质酸降解与透明质酸酶、温度、或氧自由基有关。通过化学交联，可以避免透明质酸的快速降解，从而延长作用时间。已上市的产品中，主要采用1,4-丁二醇二缩水甘油醚(BDDE)和二乙烯基砜(DVS)作为交联剂。这两种交联剂均具有生物毒性。未去除完全可能会引起红肿、过敏等不良反应。另外，通过化学交联剂交联后的透明质酸钠，有一定的支撑性，不易在注射部位扩散，可能形成凸起。

胶原蛋白可促进成纤维细胞的增殖和修复，具有良好的生物相容性、可生物降解性以及生物活性。真皮内注射胶原蛋白，可以原位补充皮肤中的胶原蛋白，改善肤质，减少静态纹，改善皮肤松弛、增强皮肤弹性；同时刺激新的胶原蛋白合成及组织修复重塑；材料代谢后的氨基酸也可作为营养成分持续刺激成纤维细胞。目前市场上的胶原蛋白产品主要为动物源性胶原蛋白。例如“双美肤柔美”为猪皮中提取的胶原蛋白，“弗缦”为牛胶原。动物源胶原蛋白从牛跟腱、猪皮、鱼皮等组织中提取，存在免疫反应和携带病毒的风险。近年来，研究人员通过基因工程技术制备重组胶原蛋白。重组胶原蛋白是采用重组DNA技术，对编码所需人胶原蛋白质的基因进行遗传操作和(或)修饰，利用质粒或病毒载体将目的基因带入适当的宿主细胞(细胞、酵母或其他真核细胞等)中，表达并翻译成胶原蛋白或类似胶原蛋白的多肽，经过提取和纯化等步骤制备而成。与动物源性胶原蛋白相比，重组胶原蛋白具有水溶性好、免疫原性低、无交叉感染风险等优势。

中国专利CN 106215244 A提供了一种透明质酸钠的复方溶液及其纠正皮肤皱纹的应用，是以透明质酸钠、L-肌肽、氨基酸和水溶性维生素为主要成分的复方溶液。该溶液以非交联透明质酸钠为主，在皮肤中维持时间较短。透明质酸和胶原蛋白均为皮肤的主要成分，但目前同时包含透明质酸和胶原蛋白的注射制剂较少。中国专利CN 114874468 A提供了一种用于泪沟填充的透明质酸复合凝胶及其制备工艺，通过中、低透明质酸钠和重组胶原的物理混合制成，未进行交联，体系稳定性差。

因此，开发一种维持时间长、改善皮肤状态的透明质酸钠-重组胶原蛋白复合凝胶是本领域亟待解决的技术问题。

发明内容