[发明专利]一种细胞外囊泡富集材料及其制备方法和应用在审
申请号: | 202310088118.3 | 申请日: | 2023-02-09 |
公开(公告)号: | CN116217946A | 公开(公告)日: | 2023-06-06 |
发明(设计)人: | 张海洋;陈梦茜;汪维鹏 | 申请(专利权)人: | 苏州大学 |
主分类号: | C08G81/02 | 分类号: | C08G81/02;C12N5/09;C12N5/071;B01J20/26;B01J20/28;B01J20/30 |
代理公司: | 苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙) 32257 | 代理人: | 夏苏娟 |
地址: | 215000 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 细胞 外囊泡 富集 材料 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种细胞外囊泡富集材料的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
S11:制备DSPE-PEG-多巴胺和苯硼酸修饰聚丙烯酸微球;所述DSPE-PEG-多巴胺由反应性DSPE-PEG和多巴胺反应得到;所述苯硼酸修饰聚丙烯酸微球由胺化聚丙烯酸微球、对醛基苯硼酸和腈基硼氢化钠反应得到;
S12:将所述DSPE-PEG-多巴胺、苯硼酸修饰聚丙烯酸微球、乙醇水溶液、Tris-HCl缓冲液、N-羟基琥珀酰亚胺和碳二亚胺混合后反应,得到所述细胞外囊泡富集材料。
2.如权利要求1所述的细胞外囊泡富集材料的制备方法,其特征在于,所述步骤S11中,反应性DSPE-PEG为DSPE-PEG-COOH。
3.如权利要求1所述的细胞外囊泡富集材料的制备方法,其特征在于,所述步骤S11中,反应性DSPE-PEG和多巴胺的反应时间为4-8h。
4.如权利要求1所述的细胞外囊泡富集材料的制备方法,其特征在于,所述步骤S11中,反应性DSPE-PEG和多巴胺的质量比为4-6:1。
5.如权利要求1所述的细胞外囊泡富集材料的制备方法,其特征在于,所述步骤S11中,胺化聚丙烯酸微球、对醛基苯硼酸和腈基硼氢化钠的反应时间为48-72h。
6.如权利要求1所述的细胞外囊泡富集材料的制备方法,其特征在于,所述步骤S11中,胺化聚丙烯酸微球、对醛基苯硼酸和腈基硼氢化钠的质量比为4-6:7:6。
7.如权利要求1所述的细胞外囊泡富集材料的制备方法,其特征在于,所述步骤S12中,DSPE-PEG-多巴胺、苯硼酸修饰聚丙烯酸微球、N-羟基琥珀酰亚胺和碳二亚胺的质量比为1:5-15:5-15:20。
8.如权利要求1所述的细胞外囊泡富集材料的制备方法,其特征在于,所述步骤S12中,反应的时间为5-7h。
9.一种权利要求1-8中任一项所述制备方法制备得到的细胞外囊泡富集材料。
10.权利要求9所述细胞外囊泡富集材料在富集细胞外囊泡的应用,其特征在于,包括如下步骤:
S21:将生物样本、PBS溶液、壬基酚聚氧乙烯醚和曲拉通X-100混合,得到混合溶液;
S22:将所述混合溶液孵育后除杂,完成对细胞外囊泡的富集;
S23:调节缓冲溶液pH值,完成对细胞外囊泡的无损释放。
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