[发明专利]一种筛选紧密结合过渡态金属离子的方法

权利要求书

1.一筛选紧密结合过渡态金属离子的适配体DNA的方法，其特征在于，所述方法包括筛选ssDNA片段、洗脱ssDNA和PCR扩增获得步骤。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述筛选包括将ssDNA文库与含过渡态金属离子的缓冲液孵育，通过dPAGE回收发生条带迁移的ssDNA片段。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述洗脱包括对dPAGE中发生条带迁移的区域进行胶回收，洗脱，沉降获得特定ssDNA。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增包括以回收得到的ssDNA作为模板，利用PCR反应进行扩增。

5.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，所述过渡态金属离子选自二价锌离子或二价镉离子。

6.根据权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于，所述PCR反应扩增紧密结合锌离子的DNA的引物如SEQ ID NO：1-2所示，所述PCR反应扩增紧密结合镉离子DNA的引物序列如SEQ ID NO：3-4所示。

7.根据权利要求1-6任一项所述的方法获得的紧密结合过渡态金属离子的适配体DNA。

8.根据权利要求7所述的DNA，其特征在于，所述适配体DNA包含如SEQ IDNO：5-10所示的核苷酸序列，或包含与SEQ ID NO：5-10具有至少80％，85％，90％，95％，99％同一性且能够紧密结合二价锌离子或二价镉离子的核苷酸序列。

9.紧密结合二价锌离子的适配体DNA，其特征在于，所述DNA包含如SEQ IDNO：5-8所示的核苷酸序列，或包含与SEQ ID NO：5-8具有至少80％，85％，90％，95％，99％同一性且能够紧密结合二价锌离子的核苷酸序列。

10.紧密结合二价镉离子的适配体DNA，其特征在于，所述DNA包含如SEQ IDNO：9-10所示的核苷酸序列，或包含与SEQ ID NO：9-10具有至少80％，85％，90％，95％，99％同一性且能够紧密结合二价镉离子的核苷酸序列。

11.根据7-9所述的适配体DNA联合二价锌在制备诱导细胞凋亡试剂中的应用。