[发明专利]聚山梨酯类辅料的分析鉴定方法

说明书

本发明公开了一种聚山梨酯类辅料的分析鉴定方法。本发明采用超临界流体合相色谱法建立的分析方法中以二氧化碳和乙腈/乙醇为流动相，对聚山梨酯20、聚山梨酯60和聚山梨酯80进行组分分离能得到较好的分离度，同时为聚山梨酯产品批间一致性和稳定性质量监测提供了一种可参考的方法。

技术领域

本发明属于分析检测技术领域，具体涉及聚山梨酯类辅料的分析鉴定方法。

背景技术

聚山梨酯系列辅料是重要的表面活性剂辅料，在《中国药典》四部中收载有聚山梨酯20、聚山梨酯40、聚山梨酯60和聚山梨酯80的质量标准。聚山梨酯的组成十分复杂，组分表征在质量控制方面存在挑战。目前，有采用基质辅助激光解吸/电离时间飞行质谱(MALDI-TOF-MS)来快速分析聚山梨酯80的报道，然而，由于缺乏足够的质量分辨率，仅用MALDI-TOF-MS很难鉴定出质量接近的寡聚物；也有采用超高效液相色谱法/质谱联用(UPLC-MS)法快速分析聚山梨酯系列辅料的报道(Wang Z,Wang Y,Cai T,et al.Journalof Chromatography A,2019:460450.)，但用来分析鉴定的化合物数据库中只包含853个化合物，远远少于聚山梨酯系列辅料中可能存在的化合物总数，并且分析过程需要消耗大量的有机溶剂。

以聚山梨酯80和聚山梨酯20为代表的聚山梨酯辅料在药物制剂中的作用十分重要，主要作为难溶性药物的增溶剂或生物大分子药物的稳定剂使用，在制剂配方中属于关键性辅料。它的组成变异将会直接影响对药物的增溶和稳定功能。因此，高效能的分析方法对于精准鉴定聚山梨酯组成使其实现质控具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种采用超临界流体色谱和质谱联用的聚山梨酯类辅料分析鉴定方法。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

聚山梨酯类辅料的分析鉴定方法，包括以下步骤：

步骤1，取供试品，加甲醇溶解，配制成浓度为0.2mg/mL的溶液作为供试品溶液；

步骤2，采用超临界流体色谱和质谱联用对供试品溶液进行检测，得到测定结果；

所述超临界流体色谱条件如下：

ACQUITY UPC² Torus Diol色谱柱，规格为3.0mm×100mm,1.7μm,130A

柱温：50℃

流速：1.0mL/min

进样体积：1μL

背压：2500psi

流动相：A为CO₂，B为甲醇和乙腈按体积比30：70组成的混合溶液，梯度洗脱程序为：0～0.2min，8％ B；0.2～12.0min，8％～15％ B；12.0～18.0min，15％～20％ B；18.0～31.0min，20％～35％ B；31.0～34.0min，35％～50％ B；34.0～34.2min，50％～8％ B；34.2～37.0min，8％B；离子化溶剂为甲醇和5mmol/L甲酸铵的混合溶液，流速为0.2mL/min；

所述质谱条件如下：

离子化模式：ESI⁺；雾化气温度：500℃；雾化气流速：800L/h；源温度：120℃；毛细管电压：2.5KV；锥孔电压：40V；采集模式：MS^E；扫描范围：m/z 50～3000；

步骤3，将测定结果与已经建立的聚山梨酯80指纹图谱进行对照，实现对聚山梨酯类辅料的分析鉴定；

所述聚山梨酯类辅料为聚山梨酯20、聚山梨酯60、聚山梨酯80。