[发明专利]一种海洋生物抗菌肽药物提取方法有效
| 申请号： | 202310107775.8 | 申请日： | 2023-02-09 |
| 公开（公告）号： | CN116287074B | 公开（公告）日： | 2023-10-13 |
| 发明（设计）人： | 夏伟;冷敦鹏;李华;臧学运;刘思喜;王友娟;李勤芳 | 申请（专利权）人： | 青岛中仁动物药品有限公司 |
| 主分类号： | C12P21/06 | 分类号： | C12P21/06;C07K1/22;B01D15/08 |
| 代理公司： | 北京睿博行远知识产权代理有限公司 11297 | 代理人： | 华锦峰 |
| 地址： | 266329 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 海洋生物 抗菌 药物 提取 方法 | ||
1.一种海洋生物抗菌肽药物提取方法，其特征在于，所述提取方法为：首先利用内切酶断裂黄鲫蛋白生成活性肽组份，然后采用磷脂功能化改性D101大孔吸附树脂Rpf筛选出抗菌肽组份，其具体的制备步骤如下：
步骤S1，把活性肽组份配制成活性肽溶液；
步骤S2，称取100mg磷脂功能化改性D101大孔吸附树脂Rpf加入到100mL三角瓶Ⅰ中，向三角瓶Ⅰ中加入活性肽溶液，将其放置在恒温振荡器中震荡，震荡温度为30-40℃、转速为150-200r/min，把磷脂功能化改性D101大孔吸附树脂Rpf从三角瓶Ⅰ中取出之后加入到三角瓶Ⅱ中，向三角瓶Ⅱ中加入磷酸盐缓冲液，在温度30-40℃、转速150-200r/min下震荡，得到黄鲫抗菌肽组份。
2.根据权利要求1所述的一种海洋生物抗菌肽药物提取方法，其特征在于，所述磷脂功能化改性D101大孔吸附树脂Rpf的制备方法包括如下步骤：
步骤S1，通过傅克反应以三溴化铝为催化剂、1,4-二(溴甲基)苯为溴甲基化试剂，在D101大孔吸附树脂表面接枝溴甲基官能团制备得到溴甲基化D101大孔吸附树脂：
步骤S2，通过4-乙烯苯甲醛的醛基官能团与甘油磷脂的羟基官能团发生羟醛缩合反应制备得到烯基化磷脂单体Apm；
步骤S3，采用原子转移自由基聚合法，以溴甲基化D101大孔吸附树脂的溴甲基官能团为诱发剂，在树脂表面接枝烯基化磷脂单体Apm，得到磷脂功能化改性D101大孔吸附树脂Rpf。
3.根据权利要求2任一项所述的一种海洋生物抗菌肽药物提取方法，其特征在于，所述步骤S2：甘油磷脂为甘油磷脂酰胆碱、甘油磷酸酯中的一种。
4.根据权利要求1-3任一项所述的一种海洋生物抗菌肽药物提取方法，其特征在于，所述磷脂功能化改性D101大孔吸附树脂Rpf为磷脂功能化改性D101大孔吸附树脂Rpf-Ⅰ和/或磷脂功能化改性D101大孔吸附树脂Rpf-Ⅱ。
5.根据权利要求1所述的一种海洋生物抗菌肽药物提取方法，其特征在于，所述磷脂功能化改性D101大孔吸附树脂Rpf为磷脂功能化改性D101大孔吸附树脂Rpf-Ⅲ。
6.根据权利要求1所述的一种海洋生物抗菌肽药物提取方法，其特征在于，所述内切酶为胃蛋白酶或胰蛋白酶。
7.根据权利要求1所述的一种海洋生物抗菌肽药物提取方法，其特征在于，所述磷脂功能化改性D101大孔吸附树脂Rpf可以填充在层析柱中使用。
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