[发明专利]一种动物皮张中炭疽杆菌快速检测盒及检测方法

权利要求书

1.一种动物皮张中炭疽杆菌快速检测盒，其特征在于，包括壳体，所述壳体内设置有检测反应体系，所述检测反应体系包括MIX预混液、BstDNA聚合酶、引物混合液、显色液、阴性对照物质和阳性对照物质；所述引物混合液包括上游外部引物、上游内部引物、下游外部引物和下游内部引物。

2.根据权利要求1所述一种动物皮张中炭疽杆菌快速检测盒，其特征在于，所述上游外部引物为F3，其碱基序列为5’-ACTAACTTGTCATAGTCAGTGTA-3’；所述上游内部引物为FIP，其碱基序列为5’-ATTGTGGTTCTCTAAGCCGATGGGTGTAATGTGAAGTAACTCG-3’；所述下游外部引物为B3，其碱基序列为5’-TGGGGTGGAATACTAAGGT-3’；所述下游内部引物为BIP，其碱基序列为5’-CACGTAATTCCATTCTTACAGCGGAGCAGATAATACTTGGACGAA-3’。

3.根据权利要求1所述一种动物皮张中炭疽杆菌快速检测盒，其特征在于，所述MIX预混液主要成分为dNTP、Ca2+、Mg2+等。

4.根据权利要求1所述一种动物皮张中炭疽杆菌快速检测盒，其特征在于，所述显色液为SYBR GreenⅠ荧光染料。

5.根据权利要求1所述一种动物皮张中炭疽杆菌快速检测盒，其特征在于，所述阴性对照物质为去离子双蒸水。

6.根据权利要求1所述一种动物皮张中炭疽杆菌快速检测盒，其特征在于，所述阳性对照物质为合成炭疽杆菌质粒。

7.根据权利要求1所述一种动物皮张中炭疽杆菌快速检测盒，其特征在于，所述上游外部引物和所述下游外部引物浓度均为10mol/L。

8.根据权利要求1所述一种动物皮张中炭疽杆菌快速检测盒，其特征在于，所述上游内部引物和所述下游内部引物浓度均为40mol/L。

9.根据权利要求1所述一种动物皮张中炭疽杆菌快速检测盒，其特征在于，所述MIX预混液浓度为2X，所述显色液浓度为10U/L。

10.一种动物皮张中炭疽杆菌快速检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤S1,取适量的待检动物皮张于灭菌的烧杯中，加入少量蒸馏水(若为盐渍皮张，先用大量清水洗掉皮张上的盐份)，置高压灭菌锅中灭菌20min；

步骤S2,取出灭菌好的皮张，挑取有代表性部位的样品置于5mL均质管中；

步骤S3,加入3mL灭菌生理盐水，均质2min；

步骤S4,取1ml均质液煮沸，离心；

步骤S5,倒掉上清液，加入300μL灭菌生理盐水溶解残渣作为待测样；

步骤S6,将待测样加入检测盒中，置于65℃恒温水浴箱中反应40min；

步骤S7,取出检测盒观察颜色变化判定结果。