[发明专利]一种高效去除新生牛血清内毒素的方法

权利要求书

1.一种高效去除新生牛血清内毒素的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1备料：准备新生牛血清，备用；

S2硅藻土提纯：将粗品质硅藻土加水打浆，筛分，去杂，分级，沉降或压滤脱水，干燥，得初级提纯土；将初级提纯土与稀硫酸搅拌均匀，加热，洗涤，固液分离，干燥，即得提纯后的硅藻土，备用；

S3第一次离心：将S2中提纯后的硅藻土加入S1所述新生牛血清中，吸附内毒素后，离心，取上清液；

S4第一次过滤：将S3中所得上清液过滤，取滤液；

S5聚己内酯微纳米颗粒优化：将白藜芦醇与载体材料聚己内酯混合，制备得负载白藜芦醇的聚己内酯微纳米颗粒；

S6第二次离心：在S4所得的滤液中加入S5所得的聚己内酯微纳米颗粒，静态吸附血清中残余内毒素，待吸附完成后，离心，收集聚己内酯微纳米颗粒，用NaOH溶液处理再生利用，取离心液；

S7第二次过滤：将S6中所得离心液经过分级过滤，得滤液即为内毒素检测合格的新生牛血清。

2.根据权利要求1所述的一种高效去除新生牛血清内毒素的方法，其特征在于，所述S2中，所述粗品质硅藻土和水的重量比例为1：4～8；之后采用10～20目筛筛分，加入分散剂进行去杂，所述分散剂选自聚丙烯酰胺、柠檬酸钠、三聚磷酸钠中的任意一种；并采用三级水力旋流器进行分级，在60～80℃下干燥2～3h；之后将初级提纯土与质量百分比16～28％的稀硫酸混合；在180～240℃加热1.5～2.5h；利用蒸馏的方式进行固液分离；之后在60～70℃下干燥。

3.如权利要求2所述的一种高效去除新生牛血清内毒素的方法，其特征在于，所述S3中，所述提纯后的硅藻土为所述新生牛血清重量的1.5～5.5％，所述提纯后的硅藻土在加入所述新生牛血清之前用内毒素合格的超纯水浸泡、清洗以及用2～3倍体积的NaCl-PB缓冲液浸泡平衡10～18h；吸附内毒素时在3～7℃环境下吸附26～30h；离心时在-6℃～-1℃、离心力6000N～12000N条件下离心12～18min。

4.如权利要求3所述的一种高效去除新生牛血清内毒素的方法，其特征在于，所述S4中，所述过滤：通过0.35～0.55μm滤膜。

5.如权利要求4所述的一种高效去除新生牛血清内毒素的方法，其特征在于，S5中，所述聚己内酯微纳米颗粒优化的具体步骤为：

S51将聚己内酯充分溶解于四氢呋喃和丙酮的混合溶剂中，加入白藜芦醇，在搅拌下加入蒸馏水，得混合物；

S52将S51得到的混合物继续搅拌挥发有机溶剂，然后用去离子水离心洗涤，离心后去上清，收集沉淀，经干燥后即可得到负载白藜芦醇的聚己内酯微纳米颗粒。

6.如权利要求5所述的一种高效去除新生牛血清内毒素的方法，其特征在于，所述S6中，所述聚己内酯微纳米颗粒的添加量为每1000kg所述滤液中添加2.5～4.5kg，所述聚己内酯微纳米颗粒在加入之前用常规符合生理条件要求的缓冲溶液浸泡、清洗、平衡。

7.如权利要求6所述的一种高效去除新生牛血清内毒素的方法，其特征在于，所述缓冲溶液是柠檬酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液或tris缓冲液中的任意一种，所述浸泡、清洗、平衡的方法为：将所述聚己内酯微纳米颗粒用2～4倍体积的所述缓冲溶液浸泡20～25min，抽滤、干燥，重复上述操作2～6次后，再将所述聚己内酯微纳米颗粒浸泡于1～3倍体积的所述缓冲溶液中，备用。

8.如权利要求7所述的一种高效去除新生牛血清内毒素的方法，其特征在于，所述S7中，所述分级过滤：经过0.20～0.30μm滤膜、0.08～0.12μm滤膜分级过滤。