[发明专利]一种从瑶药六方藤中提取多种单体化合物的方法

说明书

本发明涉及中药提取分离技术领域，具体公开了一种从瑶药六方藤中提取多种单体化合物的方法。该方法包括将六方藤药材粉碎、经75%乙醇渗漉提取得到乙醇总提取物，将乙醇总提取物用水混悬，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收溶剂，得到石油醚部位浸膏、乙酸乙酯部位浸膏和正丁醇部位浸膏，以及石油醚部位和乙酸乙酯部位的分离纯化等步骤。采用本发明方法能从六方藤药材中提取分离得到β‑谷甾醇、白藜芦醇、没食子酸、岩白菜素、原儿茶酸、齐敦果酸等25个单体化合物，为更好的开发利用瑶药六方藤药材资源，发挥其药用价值，提供了物质基础。

技术领域

本发明涉及中药提取分离技术领域，具体涉及一种从瑶药六方藤中提取多种单体化合物的方法。

背景技术

六方藤（ Cissus hexangularisThorel ex Planch.）为葡萄科白粉藤属藤本植物，又名六方钻或抽筋藤、方茎宽茎藤、翅茎白粉藤等，分布于广西、福建、广东、海南等地，以藤入药，晒干或鲜用。味辛、微苦，性凉，归肝、肾经，具有祛风活络、散瘀活血功能。主治风湿关节痛，腰肌劳损，跌打损伤。六方藤是瑶族习用药材，为瑶药“虎牛钻风”中的六方钻。已被收录于2014版《广西壮族自治区瑶药材质量标准（第一卷）》，瑶药名：落帮准，瑶医多用于崩闭闷（风湿性关节痛)，改闷（腰痛，腰肌劳损），播冲（跌打损伤）及眸名肿毒（痈疮肿毒）。

六方藤化学成分复杂，现有研究显示其含有黄酮类、皂苷类、糖类、酚类、蒽醌类、甾萜类、生物碱及挥发油等化学成分。在六方藤药材的化学成分研究方面，检索到相关的文献，如，题名为《翅茎白粉藤化学成分鉴别预试研究》的文献，作者：姚瑰玮、陈湛娟、杨斯斯,等，首次考察了翅茎白粉藤藤茎部分的化学成分，根据预试鉴别结果，可初步判断翅茎白粉藤中含有糖类、苷类、皂苷、鞣质、黄酮类、酚类、香豆素、强心苷、蒽醌类、甾萜类、生物碱及挥发油等化学成分，并初步判断翅茎白粉藤可能含有少量有机酸，且未检测到翅茎白粉藤中含有氨基酸、多肽及蛋白质。又如，题名为《不同产地六方藤挥发油成分比较研究》的文献，作者：梁爽，莫礼艳，陈诗曼，等，采用水蒸气蒸馏法提取六方藤的挥发油成分，用气相色谱-串联质谱技术进行测定，结合计算机检索技术对分离的化合物进行结构鉴定并用色谱峰面积归一化法获得各化合物的相对含量，并用因子分析对六方藤挥发油进行质量评价。

但目前关于六方藤药材的化学成分研究报道较少，对六方藤药材中化学成分的提取和研究还不充分。现代药理学研究表明白粉藤属植物具有多种潜在的抗菌、抗炎、抗氧化、抗过敏、抗肿瘤、拮抗内皮素和蛇毒、治疗糖尿病等多种生物活性。为进一步丰富六方藤药材的化学成分研究资料，寻找新的具有较好活性的抗氧化、抗过敏、抗肿瘤、拮抗内皮素、治疗糖尿病等先导化合物，更好的开发利用瑶药六方藤药材资源，发挥其药用价值，对六方藤药材中单体化合物的开发和分离是亟待需要的。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足而提供的一种从瑶药六方藤中提取多种单体化合物的方法。采用该方法能从六方藤药材中提取分离得到25个单体化合物，为进一步丰富六方藤药材的化学成分研究资料，更好的开发利用瑶药六方藤药材资源、发挥其药用价值提供物质基础。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种从瑶药六方藤中提取多种单体化合物的方法，包括以下步骤：

（1）将六方藤药材粉碎得粗粉，加入药材重量10倍量、体积浓度为75%的乙醇渗漉提取，渗漉流速为3ml/min•kg，合并提取液，减压浓缩，回收溶剂，得到六方藤药材乙醇总提取物；

（2）将乙醇总提取物用水混悬，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收溶剂，得石油醚部位浸膏、乙酸乙酯部位浸膏和正丁醇部位浸膏；

（3）石油醚部位分离：

取石油醚部位浸膏，用硅胶柱色谱分离，使用石油醚:乙酸乙酯体积比=100:0→0:1的混合溶剂梯度洗脱，TCL检识，合并相同组分，共获得4个组分，分别记作Fr1、Fr2、Fr3、Fr4；