[发明专利]一种高纯度与高活性的辣木叶多糖及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种高纯度与高活性的辣木叶多糖的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

(1)制备辣木叶多糖提取液：制备申请号为CN202210833825.6的中国专利申请权利要求1中的提取液2，即为本发明的多糖提取液1；

(2)树脂吸附及过滤：向步骤(1)所得多糖提取液1中加入非离子型大孔树脂，匀速搅拌后过滤得多糖提取液2；

(3)蛋白酶酶解：调节步骤(2)所得多糖提取液2的pH值后加入Alcalase酶和胰酶，恒温搅拌进行酶解，得多糖提取液3；

(4)树脂吸附、过滤及离心：向步骤(3)所得多糖提取液3中加入离子型大孔树脂，匀速搅拌后过滤、离心得多糖提取液4；

(5)超滤、浓缩：对步骤(4)所得多糖提取液4进行超滤分离后浓缩得多糖提取液5；

(6)透析：对步骤(5)所得多糖提取液5透析得多糖提取液6；

(7)冷冻干燥：对步骤(6)所得多糖提取液6进行冷冻干燥，得到辣木叶多糖。

2.根据权利要求1所述一种高纯度与高活性的辣木叶多糖的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述多糖提取液1的制备方法具体为：

1)液氮粉碎：将干辣木叶经液氮粉碎装置粉碎至干粉末，得到辣木叶干粉；

2)纤维素酶酶解：将步骤1)所得辣木叶干粉与水混合均匀，调节pH，充分混匀后加入纤维素酶，恒温搅拌进行酶解，得混悬液1；

3)加热提取：将混悬液1升温加热提取，得混悬液2；

4)酵母发酵：在混悬液2中加入活性干酵母，恒温转动发酵，得混悬液3；

5)离心、浓缩：混悬液3离心，取上清液经减压浓缩得提取液A；

6)乙醇沉淀：向提取液A中加入乙醇溶液，充分混匀后得到混合溶液，静置，离心，取沉淀加入水，加热充分溶解，经减压浓缩得多糖提取液1。

3.根据权利要求1所述一种高纯度与高活性的辣木叶多糖的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述非离子型大孔树脂为XAD-16大孔树脂，加入非离子型大孔树脂的质量与步骤(1)中多糖提取液1的体积之比为40～60g/L，搅拌的速率为100～120r/min，搅拌的温度为50～60℃，搅拌的时间为1～2h，过滤滤布的目数为80～120目。

4.根据权利要求1所述一种高纯度与高活性的辣木叶多糖的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，使用氢氧化钠溶液调节多糖提取液2的pH值为7.0～8.0，加入Alcalase酶的质量为步骤(2)所得多糖提取液2中蛋白质量的1％～3％，加入胰酶的质量为步骤(2)所得多糖提取液2中蛋白质量的1％～3％，酶解的温度为50～60℃，搅拌的速率为120～180r/min，酶解的时间为24～36h。

5.根据权利要求1所述一种高纯度与高活性的辣木叶多糖的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，所述离子型大孔树脂为D-280大孔树脂，加入离子型大孔树脂的质量与步骤(3)中多糖提取液3的体积之比为40～60g/L。

6.根据权利要求1所述一种高纯度与高活性的辣木叶多糖的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，搅拌的速率为100～120r/min，搅拌的温度为50～60℃，搅拌的时间为1～2h，过滤滤布的目数为80～120目，离心的温度为4～8℃，离心的离心力为6000～8000g，离心的时间为15～25min。

7.根据权利要求1所述一种高纯度与高活性的辣木叶多糖的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，进行超滤采用的超滤膜的分子量为8000～12000Da，所述超滤的次数为5～7次，所述多糖提取液5为分子量10000Da的超滤截留液，所述浓缩的温度为50～60℃，所述多糖提取液5中固形物含量为2wt％～4wt％。

8.根据权利要求1所述一种高纯度与高活性的辣木叶多糖的制备方法，其特征在于，步骤(6)中，所述透析是将多糖提取液5装进截留分子量为8000～14000Da的透析袋中，在温度为4～10℃的去离子水中透析24～48h，每隔8～12h换一次水，多糖提取液6为透析袋中的液体。