[发明专利]一种噬菌体展示筛选CD32a单链抗体及制备方法和应用

权利要求书

1.一种噬菌体展示筛选CD32a单链抗体，其特征在于：所述CD32a单链抗体的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.如权利要求1所述的一种噬菌体展示筛选CD32a单链抗体，其特征在于：所述CD32a单链抗体包括轻链区和重链区，所述轻链区的核苷酸序列如SEQ IDNO.2所示；所述重链区的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

3.如权利要求1-2任一项所述的一种噬菌体展示筛选CD32a单链抗体的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

S1，对兔抗人CD32a抗体轻链区序列进行扩增，对兔抗人CD32a抗体重链区序列进行扩增；

S2，将兔抗人CD32a抗体轻链区序列、对兔抗人CD32a抗体重链区序列通过overlap的方式连接起来，得到SCFV单链抗体序列；

S3，pMED1载体酶切；

S4，酶切后的pMED1载体与步骤S2的SCFV单链抗体序列连接，然后经过电转和多轮筛选得到高亲和力的抗体序列。

4.如权利要求3所述的一种噬菌体展示筛选CD32a单链抗体的制备方法，其特征在于：采用sfil酶对pMED1载体进行酶切。

5.如权利要求3所述的一种噬菌体展示筛选CD32a单链抗体的制备方法，其特征在于：步骤S1中轻链区序列扩增的引物为Sfil-VL1和Sfil-VL2中任一引物与VL-b4J2-linker和VL-b9J2-linker中任一引物的组合；其中Sfil-VL1引物如SEQ ID NO.4所示；Sfil-VL2引物如SEQ ID NO.5所示；VL-b4J2-linker引物如SEQ ID NO.6所示；VL-b9J2-linker引物如SEQID NO.7所示。

6.如权利要求3所述的一种噬菌体展示筛选CD32a单链抗体的制备方法，其特征在于：步骤S1中重链区序列扩增的引物为Linker-VH1、Linker-VH2、Linker-VH3和Linker-VH4中任一引物与CH1-Sfil引物的组合；其中Linker-VH1引物如SEQ ID NO.8所示；Linker-VH2引物如SEQ ID NO.9所示；Linker-VH3引物如SEQ ID NO.10所示；Linker-VH4引物如SEQ IDNO.11所示；CH1-Sfil引物如SEQ ID NO.12所示。

7.如权利要求1-2任一项所述的一种噬菌体展示筛选CD32a单链抗体在制备治疗艾滋病药物中的应用。

8.一种嵌合型抗原受体，其特征在于：包含如权利要求1-2任一项所述的CD32a单链抗体。

9.如权利要求8所述的一种嵌合型抗原受体在制备治疗艾滋病药物中的应用。