[发明专利]一种多聚磷酸盐依赖型激酶的突变体蛋白及其应用在审
申请号: | 202310160355.6 | 申请日: | 2023-02-24 |
公开(公告)号: | CN116286716A | 公开(公告)日: | 2023-06-23 |
发明(设计)人: | 曹辉;孙鹤铭;朱文龙;秦培勇;刘珞 | 申请(专利权)人: | 北京化工大学 |
主分类号: | C12N9/12 | 分类号: | C12N9/12;C12N15/54;C12P19/02 |
代理公司: | 北京睿邦知识产权代理事务所(普通合伙) 11481 | 代理人: | 方莉 |
地址: | 100029 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 磷酸盐 依赖 激酶 突变体 蛋白 及其 应用 | ||
1.一种影响多聚磷酸盐依赖型激酶的热稳定性和酶活力的氨基酸突变子,其包括位于原多聚磷酸盐依赖型激酶(PPGMK)的如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列从N端到C端的第187位Ala突变为Arg和/或第166位Asn突变为Ser。
2.一种多聚磷酸盐依赖型激酶的突变体蛋白,其序列包含位于原多聚磷酸盐依赖型激酶(PPGMK)的如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列从N端到C端的第187位Ala突变为Arg和/或第166位Asn突变为Ser。
3.根据权利要求2所述的突变体蛋白,其特征在于,
所述突变体蛋白为1号PPGMK突变体蛋白,其序列中包含位于原多聚磷酸盐依赖型激酶(PPGMK)的如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列从N端到C端的第187位Ala突变为Arg;优选地,所述1号PPGMK突变体蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示;
和/或,所述突变体蛋白为2号PPGMK突变体蛋白,其序列中包含位于原多聚磷酸盐依赖型激酶(PPGMK)的如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列从N端到C端的第166位Asn突变为Ser;优选地,所述2号PPGMK突变体蛋白的序列如SEQ ID NO.3所示;
和/或,所述突变体蛋白为3号PPGMK突变体蛋白,其序列中包含位于原多聚磷酸盐依赖型激酶(PPGMK)的如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列从N端到C端的第187位Ala突变为Arg和位于原多聚磷酸盐依赖型激酶(PPGMK)的如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列从N端到C端的第166位Asn突变为Ser;优选地,所述3号PPGMK突变体蛋白的序列如SEQ ID NO.4所示。
4.根据权利要求2或3所述的突变体蛋白,其特征在于,所述突变体蛋白还包括上多聚磷酸盐依赖型激酶的突变体蛋白的N端或C端连接标签得到的融合蛋白;优选地,所述标签包括His标签和/或SUMO标签;进一步优选地,所述突变体蛋白还包括由1号PPGMK突变体蛋白、2号PPGMK突变体蛋白或3号PPGMK突变体蛋白的N端或C端连接His标签或SUMO标签得到的融合蛋白。
5.一种影响多聚磷酸盐依赖型激酶酶活力的核苷酸突变子,其包括位于编码原PPGMK的如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的如SEQ ID NO.5所示的核苷酸序列的从5′端到3′端方向的第496位A突变为T、第497位A突变为C、第498位T突变为C、第560位T突变为G、第561位C突变为T中的一个或几个。
6.一种编码权利要求2-4中任意一项所述的突变体蛋白的核苷酸分子,其序列中包含位于编码原PPGMK的如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的如SEQ ID NO.5所示的核苷酸序列中的从5′端到3′端方向的第496位A突变为T、第497位A突变为C、第498位T突变为C、第560位T突变为G、第561位C突变为T中的一个或几个。
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