[发明专利]一种胰腺癌免疫治疗耐药细胞系及其制备方法和应用有效
申请号: | 202310167137.5 | 申请日: | 2023-02-27 |
公开(公告)号: | CN115975942B | 公开(公告)日: | 2023-09-22 |
发明(设计)人: | 王飞;陈大卫;尚士洁;王瑞阳;张晶鑫 | 申请(专利权)人: | 山东第一医科大学附属肿瘤医院(山东省肿瘤防治研究院;山东省肿瘤医院) |
主分类号: | C12N5/09 | 分类号: | C12N5/09;C12N5/071;C12Q1/02;C12R1/91 |
代理公司: | 北京东方盛凡知识产权代理有限公司 11562 | 代理人: | 程小芳 |
地址: | 250117 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 胰腺癌 免疫 治疗 耐药 细胞系 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种胰腺癌免疫治疗耐药细胞系PAN02-R,其特征在于,所述耐药细胞系PAN02-R已保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏日期为2023年1月8日,保藏编号为CCTCC NO:C202310。
2.根据权利要求1所述的耐药细胞系PAN02-R,其特征在于,构建方法包括以下步骤:
(1)利用胰腺癌细胞系PAN02构建C57BL/6小鼠皮下瘤模型,给予免疫检查点PD-1抗体治疗,筛选治疗后体积最大的肿瘤;
(2)无菌条件下分离筛选得到的体积最大的肿瘤组织,提取肿瘤原代细胞,对肿瘤原代细胞进行体外培养并传代,利用所述肿瘤原代细胞继续构建小鼠皮下瘤模型,给予免疫检查点PD-1抗体治疗,筛选治疗后体积最大的肿瘤;
(3)重复步骤(2)直至免疫检查点PD-1抗体治疗组的肿瘤体积与对照组相比无显著差异,筛选治疗组体积最大的肿瘤;
(4)无菌条件下分离步骤(3)中获得的肿瘤组织,提取肿瘤原代细胞,对肿瘤原代细胞进行体外培养并稳定传代,即获得胰腺癌免疫治疗耐药细胞系PAN02-R。
3.根据权利要求2所述的耐药细胞系PAN02-R,其特征在于,在步骤(1)中,所述胰腺癌细胞系为鼠源性胰腺癌细胞系。
4.根据权利要求2所述的耐药细胞系PAN02-R,其特征在于,在步骤(2)中,所述体外培养的培养基为含有10%胎牛血清的DMEM培养基。
5.根据权利要求2所述的耐药细胞系PAN02-R,其特征在于,在步骤(4)中,所述培养的条件为37℃,CO2体积浓度为5%。
6.一种如权利要求1所述的胰腺癌免疫治疗耐药细胞系PAN02-R在筛选抗胰腺癌药物靶点中的应用。
7.一种如权利要求1所述的胰腺癌免疫治疗耐药细胞系PAN02-R在筛选抗胰腺癌药物中的应用。
8.一种如权利要求1所述的胰腺癌免疫治疗耐药细胞系PAN02-R在筛选评估抗胰腺癌效果的检测试剂中的应用。
9.一种如权利要求1所述的胰腺癌免疫治疗耐药细胞系PAN02-R在制备评估抗胰腺癌效果的检测试剂中的应用。
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