[发明专利]一种分子量低纯度高的海带多糖活性片段的制备方法

权利要求书

1.一种分子量低纯度高的海带多糖活性片段的制备方法，其特征在于，操作步骤如下：

（1）降解海带多糖

将海带多糖均一组分溶于乙酸-乙酸钠缓冲液中，经过超声，加入β-甘露聚糖酶进行酶解；酶解物煮沸灭活，离心除酶，透析，冻干，获得低分子量海带多糖混合物；

所述海带多糖均一组分为粉末状，分子量为为 1.96×10⁶道尔顿，按摩尔比1：1.85：2.92由甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成；

（2）低分子海带多糖混合物的分离与纯化

将低分子量海带多糖混合物通过葡聚糖凝胶柱分离纯化，得到均一的低分子量的海带多糖活性片段；

所述海带多糖活性片段为粉末状，分子量为1371道尔顿。

2.根据权利要求1所述的一种分子量低纯度高的海带多糖活性片段的制备方法，其特征在于：步骤（1）中，所述海带多糖均一组分的结构的重复单元主要包含 →3,6)-α-D-Manp-(1→、→4)-α-D-Manp-(1→、→4)-2-O-acetyl-β-D-Glcp-(1→、→4)-β-D-Glcp-(1→、→6)-4-O-SO3-β-D-Galp-(1→、→6)-β-D-Galp-(1→、→3)-β-D-Galp-(1→和末端糖残基α-D-Glcp-(1→。

3.根据权利要求1所述的一种分子量低纯度高的海带多糖活性片段的制备方法，其特征在于：步骤（1）中，将100mg海带多糖组分溶解于10mL浓度50mmol/L、pH为4.5的乙酸-乙酸钠缓冲液中，以40千赫兹的频率超声1.5h；加入10mgβ-甘露聚糖酶（10u/mg），在50℃条件下反应3h；温度100℃条件下水浴10min，离心取上清，得到低分子量海带多糖混合物。

4.根据权利要求1所述的一种分子量低纯度高的海带多糖活性片段的制备方法，其特征在于：步骤（2）中，将10mg低分子海带多糖混合物溶于1mL蒸馏水中，加入预先处理好的G-25葡聚糖凝胶柱中，使用流速为0.15mL/min的双蒸水洗脱，由计滴自动收集器每隔10min收集一管洗脱液，通过苯酚硫酸法测定多糖含量，绘制洗脱曲线，合并同一洗脱峰的洗脱液，经过高效液相色谱检测均一性和分子量；冷冻干燥，得到均一的低分子量的海带多糖活性片段。

5.根据权利要求1所述的一种分子量低纯度高的海带多糖活性片段的用途，其特征在于：所述分子量低纯度高的海带多糖活性片段在制备抑制巨噬细胞泡沫化产品中的应用。