[发明专利]一种区分病原体DNA/RNA的核酸检测方法及试剂盒在审
| 申请号： | 202310173971.5 | 申请日： | 2023-02-28 |
| 公开（公告）号： | CN116240303A | 公开（公告）日： | 2023-06-09 |
| 发明（设计）人： | 丁佳女;郑宜文;赵梦茹 | 申请（专利权）人： | 杭州百迈生物股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/6895;C12Q1/6848;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 杭州裕阳联合专利代理有限公司 33289 | 代理人： | 金方玮 |
| 地址： | 310000 浙江省杭州市大江东产*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 区分 病原体 dna rna 核酸 检测 方法 试剂盒 | ||
1.一种区分病原体DNA/RNA的核酸检测方法，其特征在于，所述核酸检测方法包括：在引物5’端引入一段人工序列以提高引物特异性，所述人工序列与模板不互补，所述人工序列与引物3’端序列互补形成茎环结构，当模板与引物3’端不完全互补时引物以茎环结构存在，当模板与引物3’端完全互补时，茎环结构解链进行逆转录；在扩增RNA时，使合成的cDNA带有所述人工序列，在扩增时引物与cDNA完全互补。
2.根据权利要求1所述的一种区分病原体DNA/RNA的核酸检测方法，其特征在于，引物3’端有7-11个碱基与模板互补。
3.根据权利要求1所述的一种区分病原体DNA/RNA的核酸检测方法，其特征在于，引物3’端使用脱氧尿嘧啶替代脱氧胸腺嘧啶碱基。
4.根据权利要求1或2或3所述的一种区分病原体DNA/RNA的核酸检测方法，其特征在于，所述病原体为革兰氏阳性病原体、革兰氏阴性病原体或真菌病原体。
5.根据权利要求4所述的一种区分病原体DNA/RNA的核酸检测方法，其特征在于，所述病原体为革兰氏阳性病原体时，下游引物的序列如SEQ ID NO：4，SEQ ID NO：5或SEQ IDNO：6所示，上游引物的序列如SEQ ID NO：2所示，探针的序列如SEQ ID NO：7所示。
6.根据权利要求4所述的一种区分病原体DNA/RNA的核酸检测方法，其特征在于，所述病原体为革兰氏阴性病原体时，下游引物的序列如SEQ ID NO：10所示，上游引物的序列如SEQ ID NO：9所示，探针的序列如SEQ ID NO：11所示。
7.根据权利要求4所述的一种区分病原体DNA/RNA的核酸检测方法，其特征在于，所述病原体为真菌病原体时，下游引物的序列如SEQ ID NO：13所示，上游引物的序列如SEQIDNO：14所示，探针的序列如SEQ ID NO：15所示。
8.一种区分病原体DNA/RNA的核酸检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求1-3任一项所述的引物。
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