[发明专利]肺癌标志物检测试剂盒及其制备方法与使用方法

说明书

本发明提供了一种肺癌标志物检测试剂盒及其制备方法与使用方法，所述肺癌标志物检测试剂盒包括抗体蛋白和检测抗体，所述抗体蛋白包括CEA、NSE、SCCA、Cyfra211、ProGRP、CA125和CA199特异性抗体，所述检测抗体包括CEA、NSE、SCCA、Cyfra211、ProGRP、CA125和CA199特异性抗体。本发明试剂盒能够在一个样本中同时检测包括CEA、NSE、SCCA、Cyfra211、ProGRP、CA125和CA199的七种肺癌标志物含量，提高了检测的准确度，具有较高的临床价值。

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，尤其涉及一种肺癌标志物检测试剂盒及其制备方法与使用方法。

背景技术

肿瘤标志物是指在恶性肿瘤的发生和增殖过程中，由肿瘤细胞本身所产生的或是由机体对肿瘤细胞反应异常产生的、反映肿瘤存在和生长的一类物质，包括蛋白质、激素、酶(同工酶)、多胺及癌基因产物等，存在于患者的血液、体液、细胞或组织中，可用生物化学、免疫学及分子生物学等方法进行测定。传统的肿瘤标志物检测方法主要有酶联免疫法、放射免疫法、化学发光法、质谱分析法等。目前采用单项指标检测的试剂盒导致检测时间长、成本高、操作复杂。因此亟需一种能够同时检测出多种标志物的试剂。

因此，有必要提供一种新型的肺癌标志物检测试剂盒及其制备方法与使用方法以解决现有技术中存在的上述问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种肺癌标志物检测试剂盒及其制备方法与使用方法，能够联合检测多种肿瘤标志物，提高了检测肺癌的准确性。

为实现上述目的，本发明的所述肺癌标志物检测试剂盒，包括抗体蛋白和检测抗体，所述抗体蛋白包括CEA、NSE、SCCA、Cyfra211、ProGRP、CA125和CA199特异性抗体，所述检测抗体包括CEA、NSE、SCCA、Cyfra211、ProGRP、CA125和CA199抗体。

本发明肺癌标志物检测试剂盒的有益效果在于：本发明肺癌标志物检测试剂盒使用双抗体夹心检测方法，选取肺癌的高相关性蛋白的组合进行检测，能够在同一样品中同时完成肺癌多种相关蛋白的检测，可降低试剂和人工的成本，而且特异性强、灵敏度高、重复性好，提高了检测肺癌相关蛋白的准确性。

优选的，所述肺癌标志物检测试剂盒还包括固相载体，所述抗体蛋白固定于所述固相载体上，所述固相载体包括酶标板微孔、磁珠、亲和膜或液相芯片，所述液相芯片包括聚苯乙烯荧光编码微球。

优选的，所述肺癌标志物检测试剂盒还包括聚苯乙烯荧光编码微球和藻红蛋白，每个所述聚苯乙烯荧光编码微球与一种抗体蛋白结合形成抗体偶联微球复合物，每份所述藻红蛋白与一种所述检测抗体偶联形成藻红蛋白偶联抗体复合物。

优选的，所述抗体偶联微球复合物中，每50-150μg所述抗体蛋白包被在1×10⁶个所述聚苯乙烯荧光编码微球上。

优选的，所述藻红蛋白偶联抗体复合物中，所述检测抗体与所述藻红蛋白的摩尔比为1:0.8-1:1.2。

优选的，所述肺癌标志物检测试剂盒还包括样品稀释液、反应缓冲液、洗涤缓冲液，所述样品稀释液包括三羟甲基氨基甲烷和防腐剂，所述反应缓冲液包括三羟甲基氨基甲烷、防腐剂和聚山梨醇酯-20，所述洗涤缓冲液包括磷酸盐和聚山梨醇酯-20。

本发明还提供一种所述肺癌标志物检测试剂盒的制备方法，所述肺癌标志物检测试剂盒还包括聚苯乙烯荧光编码微球和藻红蛋白，每个所述聚苯乙烯荧光编码微球与一种抗体蛋白结合形成抗体偶联微球复合物，每份所述藻红蛋白与一种所述检测抗体偶联形成藻红蛋白偶联抗体复合物，所述制备方法包括以下步骤：