[发明专利]一种蟹肉DNA提取试剂盒及提取方法

权利要求书

1.一种蟹肉DNA提取试剂盒，包括裂解液，其特征在于，所述裂解液包括SDS、蛋白酶K和RNase A。

2.根据权利要求1所述的一种蟹肉DNA提取试剂盒，其特征在于，所述裂解液中包括0.6～2.4％的SDS、2％的蛋白酶K和1％的RNase A。

3.根据权利要求1所述的一种蟹肉DNA提取试剂盒，其特征在于，所述裂解液中包括1％的SDS、2％的蛋白酶K和1％的RNase A。

4.根据权利要求1所述的一种蟹肉DNA提取试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括漂洗液和洗脱液。

5.根据权利要求4所述的一种蟹肉DNA提取试剂盒，其特征在于，所述漂洗液为有机醇溶液。

6.根据权利要求4所述的一种蟹肉DNA提取试剂盒，其特征在于，所述洗脱液选自TE缓冲液、Tris-HCl缓冲液和水中的一种。

7.利用权利要求1所述的一种蟹肉DNA提取试剂盒提取蟹肉DNA的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1，在含有钢珠的磨样管中加入所述裂解液，取适量蟹肉于磨样管中，使用研磨仪50Hz，打磨1～3min；；

S2，将磨样管置于65℃水浴锅中13～15min；

S3，将磨样管置于70℃水浴锅中13～15min；

S4，将磨样管放入离心机8000～10000g离心10～15min，转上清至新的离心管中；

S5，加入0.5倍体积的氯仿，颠倒混匀直至溶液完全乳化成白色后，在12000～15000×g，4℃条件下离心8～15min；

S6，吸取上清液转移至新的灭菌离心管中；

S7，向上清液中加入0.6倍体积混合均匀的磁珠，吹打混匀，室温静置3～8min；

S8，将离心管置于磁力架，直至溶液澄清，吸弃上清；

S9，保持离心管在磁力架上，加入200μL漂洗液，室温静置20～40s后，吸弃上清；

S10，瞬时离心，弃尽离心管中多余的漂洗液，室温干燥磁珠2～5min；

S11，将离心管从磁力架上取下，室温静置2～5min；加入100μL洗脱液，用移液器轻轻吹打混匀，室温静置3～8min；

S12，将离心管置于磁力架上，室温静置3～8min至溶液澄清，吸取上清液转移到对应的新的样本保存管中，得到纯化后的蟹肉DNA。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，在步骤S10之前，重复一遍步骤S9。

9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述漂洗液为80％乙醇。

10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述洗脱液选自TE缓冲液、Tris-HCl缓冲液和水中的一种。