[发明专利]一种提高碱性蛋白酶热稳定性的方法及突变体ThAPT3-M3、ThAPT3-M4和应用在审
| 申请号： | 202310199722.3 | 申请日： | 2023-03-05 |
| 公开（公告）号： | CN116064490A | 公开（公告）日： | 2023-05-05 |
| 发明（设计）人： | 罗会颖;王宵;秦星;姚斌;王亚茹;黄火清;柏映国;苏小运;王苑;涂涛;张杰;王晓璐;张红莲;于会民 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N9/58 | 分类号： | C12N9/58;C12N15/57;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/84 |
| 代理公司： | 北京法信智言知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11737 | 代理人： | 高宇 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 提高 碱性 蛋白酶 热稳定性 方法 突变体 thapt3 m3 m4 应用 | ||
1.一种提高碱性蛋白酶热稳定性的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：将氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的碱性蛋白酶亲本PA3的第345位Ala突变为Gln。
2.一种提高碱性蛋白酶热稳定性和催化活性的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：将氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的碱性蛋白酶亲本PA3的第342位Ala突变为Glu、第345位Ala突变为Gln。
3.一种碱性蛋白酶突变体，其特征在于，所述碱性蛋白酶突变体的氨基酸序列如SEQID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:5所示。
4.一种碱性蛋白酶基因，其特征在于，所述碱性蛋白酶基因编码权利要求3所述的碱性蛋白酶突变体。
5.根据权利要求4所述的碱性蛋白酶基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如SEQID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:10所示。
6.包含权利要求4所述碱性蛋白酶基因的重组表达载体。
7.包含权利要求4所述碱性蛋白酶基因的重组菌株。
8.一种制备碱性蛋白酶的方法，其特征在于，包括以下步骤：
将权利要求6的重组表达载体转化宿主细胞；
诱导宿主细胞表达；
分离纯化获得碱性蛋白酶。
9.权利要求3所述碱性蛋白酶突变体的应用。
10.权利要求3所述碱性蛋白酶突变体水解酪蛋白的应用。
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