[发明专利]一种利用液质联用技术检测N-羟基衍生物的方法

说明书

本发明属于化学分析技术领域，特别涉及一种利用液质联用技术检测N‑羟基衍生物的检测方法，先将待测样品用有机溶剂和水的混合溶液溶解，配置成待测样品溶液，将待测样品溶液注入液质联用仪进行测定，根据色谱图分析待测样品中所含有的N‑羟基衍生物的种类及含量。本方法洗脱分离效果好，检测灵敏度高，专属性强，能使样品中各N‑羟基衍生物在同一色谱条件下分离，且灵敏度高。可以快速、准确、可靠的检测出样品中N‑羟基衍生物杂质及其含量。通过对原料药及其制剂中N‑羟基衍生物相关杂质的检测，能对合成和制剂过程的质量控制提供数据帮助和调整方向，从而有效控制原料药及其制剂的质量。

技术领域

本发明属于化学分析技术领域，特别涉及一种利用液质联用技术检测N-羟基衍生物的检测方法。

背景技术

N－羟基衍生物又名肟酸杂质，具有基因毒性杂质的警示结构，该化合物在原料药合成过程中由起始物料、合成工艺过程、降解等多种途径引入或产生，为原料药中必须研究的杂质。因上述杂质在不同原料药中的限度不等，按照ICHM7中公布的TTC法和最大日服剂量40mg为例计算限度，其限度要求均为18ppm。

目前，尚未见有关N－羟基衍生物的检测方法。而实现上述基因毒性杂质的快速分离和含量分析，对于合成和制剂过程的质量控制方面具有重要的现实意义。

发明内容

本发明旨在快速、准确、可靠的检测原料药中是否含有N-羟基衍生物、以及具体含有的N-羟基衍生物种类和含量，对于合成和制剂过程的质量控制提供数据帮助和调整方向。为此，本发明的提出了一种快速分离分析N-羟基衍生物的高效液相色谱-质谱法，从而实现了不同原料药及其制剂中关于N-羟基衍生物在同一色谱-质谱条件下的定量测定，具体采用的技术方案为一种利用液质联用技术检测N-羟基衍生物的方法，包括以下步骤：

步骤一.将待测样品用有机溶剂和水的混合溶液溶解，配置成待测样品溶液，所述有机溶剂为甲醇或乙腈；

步骤二.将待测样品溶液注入液质联用仪进行测定，测定条件为：

色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱；

色谱柱柱温为30℃～40℃；

流动相A为甲酸水溶液或三氟乙酸水溶液，其中甲酸或三氟乙酸的体积分数为0.01％～0.1％；

流动相B为含有甲酸或三氟乙酸的甲醇或乙腈，其中甲酸或三氟乙酸的体积分数为0.1％；

梯度洗脱程序为：

0～10min：流动相A的占比为40％～50％中的一个值；

10～18min：流动相A的占比为50％；

18～25min：流动相A的占比为0～10％中的一个值；

25～25.1min：100％流动相B；

25.1～30min：流动相A的占比为40％～50％中的一个值、且与0～10min流动相A的占比的值相同；

上述梯度洗脱程序使用表格来表示则如下：