[发明专利]一种PRV变异株灭活疫苗及制备方法在审
| 申请号： | 202310216820.3 | 申请日： | 2023-03-08 |
| 公开（公告）号： | CN116271000A | 公开（公告）日： | 2023-06-23 |
| 发明（设计）人： | 范克伟;傅文源;林开雄;戴爱玲;李雨琪;陈腾腾 | 申请（专利权）人： | 龙岩学院 |
| 主分类号： | A61K39/245 | 分类号： | A61K39/245;A61P31/22 |
| 代理公司： | 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人： | 齐宝玲 |
| 地址： | 364012 福建省龙*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 prv 变异 株灭活 疫苗 制备 方法 | ||
1.一种PRV变异株灭活疫苗，其特征在于，包括包括猪伪狂犬病毒PRV FJ/tiger/2015灭活病毒液、β-丙内酯和MONTANIDEISA201VG；所述猪伪狂犬病毒PRVFJ/tiger/2015病毒保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO:V202310，保藏日期为2023.02.21，保藏地址为中国.武汉.武汉大学。
2.权利要求1所述的一种PRV变异株灭活疫苗的制备方法，其特征在于，包括下述过程：
1)猪伪狂犬病毒PRVFJ/tiger/2015灭活病毒液，向病毒液中加入β-丙内酯，使β-丙内酯的终浓度为0.1％，灭活、水浴终止灭活，得灭活完全的病毒液；
2)将灭活完全后的病毒液与佐剂MONTANIDEISA201VG按照1:1质量比混合，进行乳化，得到PRV变异株灭活疫苗。
3.根据权利要求2所述的一种PRV变异株灭活疫苗的制备方法，其特征在于，猪伪狂犬病毒PRVFJ/tiger/2015灭活病毒液的制备过程为：
将猪伪狂犬病毒PRVFJ/tiger/2015按1％比例接种至长满单层的vero细胞，置37℃，5％CO2培养12-48h，当细胞病变达到80％以上，收获产生CPE的培养物，-80℃反复冻融3次，经离心后收取病毒液，分装后-80℃冰箱保存，得RVFJ/tiger/2015株灭活病毒液。
4.根据权利要求3所述的一种PRV变异株灭活疫苗的制备方法，其特征在于，步骤1)中，灭活、终止灭活为：将制备疫苗用的病毒液，加入终浓度为0.1％的β-丙内酯，4℃灭活24h，灭活期间每隔4-6h摇匀病毒液一次，37℃，水浴2h，终止灭活。
5.根据权利要求4所述的一种PRV变异株灭活疫苗的制备方法，其特征在于，步骤2)中，按重量比1：1将灭活完全的病毒液与佐剂混合，将两相加热至32℃，在注射器中缓慢推拉20次，再快速推拉60次，20℃冷却1h，得PRV变异株灭活疫苗。
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