[发明专利]一种用于预测早期慢阻肺的生物标志物及其应用和筛选方法

权利要求书

1.一种用于预测早期慢阻肺的生物标志物，其特征在于，所述生物标志物为环状RNA：circFCHO2。

2.如权利要求1所述的生物标志物在制备用于预测早期慢阻肺风险的产品中的应用。

3.如权利要求1所述的预测早期慢阻肺的生物标志物的筛选方法，其特征在于，包括：

步骤(a)、收集慢阻肺患者和健康对照者的新鲜外周血标本，进行全血RNA提取，对提取的全血RNA进行OD260/280值的检测，数值在1.8-2.0认为RNA纯度达标；

步骤(b)、对全血RNA进行处理构建circRNA文库，并利用高通量测序检测circRNA的表达，筛选出差异表达的环状RNA：P0.05和|log2(fold change)|≥1，挑选circFCHO2作为预测慢阻肺的生物标志物；

步骤(c)、扩大样本对circFCHO2经行qRT-PCR验证。

4.如权利要求3所述的生物标志物的筛选方法，其特征在于，步骤(b)的具体方法如下：

1)COPD和健康受试者的RNA首先经过去除核糖体RNA处理，circRNA建库需要提前使用RNase R酶消化掉线性RNA。将去核糖体的RNA打断成250～300bp的小片段，以该小片段为模板，逆转录为cDNA，最后通过PCR扩增建立文库；

2)将建立好的文库进行Qubit 2.0定量、Agilent 2100片段大小分析、qRT-PCR文库丰度定量等质控检测合格后，利用Illumina novaseq 6000平台进行高通量测序。