[发明专利]一种氨肽酶及其编码基因

权利要求书

1.一种氨肽酶，其特征在于，所述氨肽酶的氨基酸序列是如下(a)或(b)：

(a)如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列；

(b)将SEQ ID NO.1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加的由SEQ ID NO.1衍生的氨肽酶。

2.根据权利要求1所述的氨肽酶，其特征在于，以Leu-pNA为底物时，所述氨肽酶的比酶活为1125U/mg，或以脯氨酸-4-硝基苯胺Pro-PNA为底物时，所述氨肽酶的比酶活为1395U/mg，或以赖氨酸-4-硝基苯胺Lys-pNA为底物时，所述氨肽酶的比酶活为911U/mg。

3.一种核苷酸序列，其特征在于，是编码如权利要求1所述的氨肽酶的核苷酸序列。

4.根据权利要求3所述的核苷酸序列，其特征在于，所述核苷酸序列为如下1)至3)中任一所述的DNA分子：

1)编码区如SEQ ID NO.2所示的DNA分子；

2)在严格条件下与1)限定的DNA序列杂交且编码氨肽酶相关蛋白的DNA分子；

3)与1)限定的DNA序列具有90％以上同源性且编码与氨肽酶相关蛋白的DNA分子。

5.如权利要求1或2所述的氨肽酶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将权利要求3或4所述的核苷酸序列克隆至表达载体中，再转入表达细胞中，得到含有重组载体的细胞；

(2)对步骤(1)得到的含有重组载体的细胞进行培养，经IPTG诱导，从培养物分离、纯化，获得氨肽酶。

6.含权利要求3或4所述基因的重组表达载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌，其特征在于，所述重组表达载体包括pMD-19T载体、pXMJ19载体、pET系列载体和pPICZ系列载体其中任意一种；所述转基因细胞的宿主包括大肠杆菌、棒杆菌、芽孢杆菌、酵母菌或丝状真菌其中任意一种。

7.如权利要求1或2所述氨肽酶在制药、食品或化妆品领域中的应用，其特征在于，所述应用为如下(c1)至(c3)中的至少一种：

(c1)作为氨肽酶；

(c2)制备功能低聚肽；

(c3)制备呈味肽。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述(c2)制备功能低聚肽或(c3)制备呈味肽的方法包括如下步骤：将所述的氨肽酶加入到含有蛋白底物的水解反应体系中，在25～65℃条件下进行酶水解反应2～6h，得到相应的功能低聚肽或呈味肽。

9.一种呈味肽，其特征在于，根据权利要求7或8所述的应用制备得到。

10.一种重组微生物，其特征在于，所述重组微生物是将权利要求3或4所述基因导入目的微生物中过表达得到的。