[发明专利]人类DNA样本定量扩增体系及其应用

权利要求书

1.人类DNA样本定量扩增体系，其特征在于，所述扩增体系包括特异性扩增以下4个靶序列的引物和探针复合物；其中，4个靶序列为：2个常染色体靶基因CSF1PO和TPOX、1个Y染色体靶基因SRY、1个非人源合成寡核苷酸IPC。

2.根据权利要求1所述的人类DNA样本定量扩增体系，其特征在于，所述非人源合成寡核苷酸IPC为人工改造的克隆质粒，其核苷酸序列如SEQ ID NO:13所示。

3.根据权利要求1所述的人类DNA样本定量扩增体系，其特征在于，所述引物和探针复合物的序列分别为：CSF1PO基因的引物序列为SEQ ID NO:1-2，探针序列为SEQ ID NO:3；TPOX基因的引物序列为SEQ ID NO:4-5，探针序列为SEQ ID NO:6；SRY基因的引物序列为SEQ ID NO:7-8，探针序列为SEQ ID NO:9；IPC寡核苷酸的引物序列为SEQ IDNO:10-11，探针序列为SEQ ID NO:12。

4.根据权利要求3所述的人类DNA样本定量扩增体系，其特征在于，所述引物和探针复合物的终浓度为：SEQ ID NO:1-2为0.4μM，SEQ ID NO:3为0.16μM；SEQ ID NO:4-5为0.24μM，SEQ ID NO:6为0.1μM；SEQ ID NO:7-8为0.3μM，SEQ ID NO:9为0.12μM；

SEQ ID NO:10-11为0.2μM，SEQ ID NO:12为0.1μM。

5.根据权利要求1所述的人类DNA样本定量扩增体系，其特征在于，所述探针的两端分别标记有荧光基团和淬灭基团；其中，荧光基团为FAM、VIC、ROX和CY5中任意一种，淬灭基团为BHQ1、BHQ2和BHQ3中任意一种，且每条探针采用的荧光基团不同。

6.根据权利要求1所述的人类DNA样本定量扩增体系，其特征在于，所述扩增体系包括反应混合液，反应混合液的组分及各组分的终浓度为：MgCl₂、3mM，Tris-HCl、50mM，KCl、50mM，dNTPs、0.2mM，UNG酶、0.01U/μL，Taq、0.1U/μL，BSA、0.5g/L。

7.权利要求1-6任一所述人类DNA样本定量扩增体系在制备法医DNA分析试剂盒中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述法医DNA分析的检材包括人的血液、血痕、精液、唾液、体液、毛发、肌肉或组织器官。

9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述法医DNA分析的样本包括利用Chelex法、磁珠提取法获得的人类基因组DNA。

10.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述试剂盒的最低检测限能够达到1pg。