[发明专利]利用化学小分子药物重编程诱导多能干细胞的方法有效
| 申请号： | 202310240260.5 | 申请日： | 2023-03-14 |
| 公开（公告）号： | CN115975914B | 公开（公告）日： | 2023-05-26 |
| 发明（设计）人： | 刘明录;金海锋;韩庆梅;冯建海;强邦明;王立新;张传鹏;许淼;李希鹏 | 申请（专利权）人： | 山东兴瑞生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/074 | 分类号： | C12N5/074;C12N5/0775 |
| 代理公司： | 山东华君知识产权代理有限公司 37300 | 代理人： | 武欢欢 |
| 地址： | 261500 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 利用 化学 分子 药物 编程 诱导 多能 干细胞 方法 | ||
1.利用化学小分子药物重编程诱导多能干细胞的方法，其特征在于：所述方法包括诱导培养和维持培养；所述诱导培养的方法为将人脐带间充质干细胞在诱导培养基中进行培养，得到pre-iPSCs细胞；所述诱导培养基以高糖DMEM为基础培养基，添加50μg/mL的维生素C、5mM的氯化锂、1mM的烟酰胺、10μM的Forskolin、100ng/mL的bFGF、1μM的15d-PGJ2、100μM的原钒酸钠、200μM的丙戊酸、10μM的5-氮杂胞苷、5μM的EPZ004777、0.2μM的DNZep、10μM的Y-27632、10μM的CHIR99021、5μM的SB431542、1μM的JNK-IN-8、1μM的PD98059、2μM的TTNPB、1μM的PD173074、1μM的ABT-869；
所述维持培养，将诱导培养得到的pre-iPSCs细胞采用维持培养基进行培养，得到iPSCs细胞；所述维持培养基以含有1%Vol的N2、2%Vol的B27、1%Vol的谷氨酰胺、1%Vol的MEM非必需氨基酸溶液、50μg/mL的维生素C的高糖DMEM为基础培养基，加入1μM的CHIR99021、10μM的Y-27632、1μM的PD0325901、2μM的IWP-2、0.5μM的SB590885、500μM的丙戊酸、10μM的Tranylcypromine、0.05μM的DZNep、5μM的EPZ004777。
2.根据权利要求1所述的利用化学小分子药物重编程诱导多能干细胞的方法，其特征在于：所述诱导培养，每3天更换一次诱导培养基；所述维持培养，每2天更换一次维持培养基。
3.根据权利要求1所述的利用化学小分子药物重编程诱导多能干细胞的方法，其特征在于：所述诱导培养之前将人脐带间充质干细胞先进行贴壁培养至融合度为80%。
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