[发明专利]一种炎症条件下诱导巨噬细胞体外转型的试剂、诱导方法和应用

说明书

本发明提供了一种炎症条件下诱导巨噬细胞体外转型的试剂、诱导方法和应用，属于生物医药技术领域。本发明提供了一种炎症条件下诱导巨噬细胞体外转型的试剂，所述试剂对PTBP1具有抑制作用。本发明提供了一种炎症条件下M1型巨噬细胞诱导为M2型巨噬细胞的新方法，通过抑制PTBP1的基因表达和/或蛋白表达，改变巨噬细胞的极化表型和细胞学特性，减轻巨噬细胞M1型所带来的相关促炎反应，诱导巨噬细胞向M2型极化并发挥抗炎作用，促进炎症性损伤的再生修复。本发明所述试剂以及M2型巨噬细胞的制备过程简单，表达稳定，制备体系易于质量控制，易于产业化。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种炎症条件下诱导巨噬细胞体外转型的试剂、诱导方法和应用。

背景技术

炎症是机体对于刺激的一种天然防御反应，任何能够引起组织损伤的因素都可成为炎症的原因。一般而论，炎症在本质上对机体是保护性的。在炎症过程中，以血管系统为中心的一系列局部反应局限并消除损伤因子，同时也促进受损组织的愈合，是组织修复和再生的前提。如果在修复过程中组织的完整性和体内平衡得到恢复，炎症会自动消退；但是在有些情况下，炎症存有潜在危害，剧烈的炎症反应往往是一些疾病的发病基础，如严重的超敏反应炎症可以威胁病人的生命。因此，使用抗炎药物来抑制过度的炎症反应就显得至关重要。

大量研究表明，巨噬细胞是参与疾病和损伤后炎症反应的主要细胞，在多种疾病发生后的损伤与抗损伤过程中扮演着重要角色。它们能够监测病原体和损伤，参与抗原吞噬和呈递，分泌活性物质和免疫信号分子，且这些物质能自由出入血脑屏障，对血脑屏障的稳态和通透性的维持都具有至关重要的作用。巨噬细胞极化是协调炎症的一个重要病理过程，可以呈现两种经典的功能表型：经典激活的M1型和替代激活的M2型，其中，M1型由IFN-r和LPS诱导，表达INOS，分泌TNF-a，IL-1β等多种促炎因子，它能够吞噬清除坏死细胞和组织碎片，促进炎症中间体的产生。当M1型被大量过度激活时，会诱发或加重组织细胞的损伤性病变。M2型由IL-4或IL-13诱导，表达ARG1，分泌IL-10、TGF-β1等抗炎因子，发挥抗炎保护作用，促进血管生成和组织重塑，抑制过度的炎症反应，促进受损组织细胞的存活。(Activation ofcorticotropin-releasing factor receptor 1aggravates dextransodium sulphate-induced colitis in mice by promoting M1 macrophagepolarization.2018)。巨噬细胞的这种极化现象是一个随时间推移而不断变化的动态病理过程。以脊髓损伤为例，在损伤发生的早期，可以监测到部分ARG1+的M2型巨噬细胞；损伤发生三天后，INOS+的M1型巨噬细胞逐渐增多；到损伤后的第七天，M2型巨噬细胞的数量逐渐减少，损伤部位主要由M1型巨噬细胞占据；14天后，M2型巨噬细胞恢复至损伤前水平，而M1型的巨噬细胞可以持续存在。这种从短暂的M2型向M1型转化的动态极化现象，标志着巨噬细胞由短期“抗炎”状态向“促炎”状态的转变。(Reversible differentiation of pro-andanti-inflammatory macrophages.2012；Repertoire of microglial and macrophageresponses after spinal cord injury.2011)。大量的研究表明，调节巨噬细胞由促炎型M1型向抗炎型M2型方向极化，是减少损伤性病变反应的关键。目前已经研究表明，多个信号通路与巨噬细胞的M1和M2转型有关，针对不同的信号通路也存在众多的调控分子，使对应信号通路关闭或激活，以实现巨噬细胞的转型。所述调控分子包括miRNA和小分子蛋白等多种物质，但其仅见于科研文献报道，其实际应用于体外的诱导有效性，是否可用于评价对应药效均未可知。

发明内容

本发明的目的在于提供一种炎症条件下诱导巨噬细胞体外转型的试剂、诱导方法和应用，在炎症条件下通过敲低PTBP1的表达来促进巨噬细胞向M2型极化，用来改善组织细胞的相关炎症性损伤。

本发明提供了一种炎症条件下诱导巨噬细胞体外转型的试剂，所述试剂对PTBP1具有抑制作用；