[发明专利]一种兽药制剂中非法添加大环内酯类药物的测定方法

说明书

本发明提供了一种兽药制剂中非法添加大环内酯类药物的测定方法，属于兽药检测技术领域。本发明提供的测定方法，包括如下步骤：(1)将兽药样品用水分散，加入乙腈溶液，经萃取、离心得到上清液；(2)用QuEChERs萃取管净化所述上清液，离心得到净化液；(3)将所述净化液与样品定容液混合，过滤，进行液相色谱‑串联质谱测定，得到测定结果；(4)根据所述测定结果，利用药物线性方程，计算得到所述大环内酯类药物的添加浓度。本发明方法适用于各种兽药剂型，不存在明显的基质效应，采用溶剂标准曲线即可进行准确定量，无需使用基质匹配校正曲线，大大简化了检测步骤和操作流程，降低了测定成本。

技术领域

本发明涉及兽药检测技术领域，尤其涉及一种兽药制剂中非法添加大环内酯类药物的测定方法。

背景技术

大环内酯类药物(Macrolides，大环内酯)是一类人工合成的具有12-16元碳内酯环结构的广谱抗生素，对革兰氏阳性菌、阴性球菌及支原体等均有较强的抑制作用，在兽医临床上广泛用于治疗禽畜动物敏感菌引起的呼吸道、胃肠道和泌尿生殖系统感染等疾病。在低剂量下，大环内酯也可用作促生长剂，以缩短饲养周期、改善饲料转化率。然而，该类抗菌药物的滥用或违规使用极易导致其在动物体内发生残留，产生耐药性等不良后果，影响动物疫情控制以及威胁食品安全。人体一旦摄入此类动物源性食品，可能会引起胃肠道等不良反应，损伤人体健康。欧盟委员会规定所有成员国禁止使用泰乐菌素、螺旋霉素等大环内酯类饲料添加剂。我国《兽药地方标准废止目录》中提出废止罗红霉素等合成抗菌类兽药的生产使用标准。此外，欧美许多国家已禁止在食品动物生产中添加大环内酯类抗生素。2019年我国也规定了红霉素、吉他霉素、螺旋霉素、泰妙霉素、替米考星5种大环内酯类药物在动物源性食品中的最高残留限量因此，为保障食品安全和人类健康，从源头上严格把控兽药用药的质量安全十分重要。

目前，关于大环内酯类药物的标准检测方法主要针对动物源性食品、饲料、土壤、化妆品等基质，对于兽药制剂中该类药物的检测分析存在较大技术盲区。现阶段大环内酯类药物的检测技术相对较为成熟，液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法因其灵敏度高和特异性强等优势逐渐成为大环内酯类药物残留检测的首选方法。大环内酯类药物的前处理技术主要包括液液萃取、加压溶剂萃取、超声辅助萃取、微波辅助萃取、固相萃取法、QuEChERS法等。然而，兽药制剂基质成分复杂多变，且兽药制剂大多由中药材组成，含有较多脂肪酸和色素，单一的萃取技术给后续测定带来较大背景干扰，使检测灵敏度降低；固相萃取步骤繁琐，耗时耗力。因此，亟需建立一种快速准确测定兽药制剂中大环内酯类药物残留的分析方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种兽药制剂中非法添加大环内酯类药物的测定方法。

为了实现上述目的，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供了一种兽药制剂中非法添加大环内酯类药物的测定方法，包括如下步骤：

(1)将兽药样品用水分散，加入乙腈溶液，经萃取、离心得到上清液；

(2)用QuEChERs萃取管净化所述上清液，离心得到净化液；

(3)将所述净化液与样品定容液混合，过滤，进行液相色谱-串联质谱测定，得到测定结果；

(4)根据所述测定结果，利用药物线性方程，计算得到所述大环内酯类药物的添加浓度。

优选的，所述大环内酯类药物包括红霉素、泰乐菌素、罗红霉素、吉他霉素、泰妙菌素、螺旋霉素、替米考星。

优选的，所述兽药制剂的剂型包括合剂、酊剂、粉剂。

优选的，所述兽药样品与水的质量体积比为1g：4～7mL；所述分散的时间为0.5～2min。

优选的，所述兽药样品与乙腈溶液的质量体积比为1g：15～25mL；所述萃取的时间为12～18min。