[发明专利]用于检测肺腺癌的标记物、引物组以及试剂盒

说明书

本发明提供了用于检测肺腺癌的标记物、引物组以及试剂盒。本发明提供了用于筛查肺腺癌的标记物miR‑4433a‑3p荧光定量PCR引物，单独使用血清miR‑4433a‑3p诊断区分良性肺腺癌结节与恶性肺腺癌结节，ROC曲线下面积AUC为0.9750；单独使用胸腔积液miR‑4433a‑3p诊断区分良性肺腺癌结节与恶性肺腺癌结节，ROC曲线下面积AUC为0.9375；单独使用血清miR‑4433a‑3p评估恶性肺结节患者术后临床效果差异显著。因此，血清miR‑4433a‑3p可以用于制备肺腺癌结节、及评估术后临床效果的诊断试剂盒，胸腔积液miR‑4433a‑3p也可以用于制备肺腺癌结节的诊断试剂盒。

技术领域

本发明属于医药生物技术领域，具体涉及用于检测肺腺癌的标记物、引物组以及试剂盒。

背景技术

肺腺癌发病率逐年增长，已经成为NSCLC中最常见的亚型，几乎占全部肺癌的50％，且总体生存率较低。由于肺腺癌早期没有典型的临床表现，仅见孤立的肺结节，或者肺部病灶较小但存在恶性胸腔积液等并发症，此时发现时已是中晚期，难以得到有效治疗。而针对早期肺癌及胸腔积液的诊断及治疗可以明显提高患者的5年生存率。

虽然大部分肺结节为良性病变，仅需随诊，不需进一步治疗，但仍有相当数量的肺结节为早期恶性病变。但肺结节的定性诊断仍较困难，可能与恶性结节缺乏特异性表现有关。另外对于结节大于2cm的T1c期肺腺癌患者切除术后，肺癌复发率明显。如果能够有一种检测手段对肺腺癌患者可以早期诊断，评估手术切除的疗效，判断复发的可能性，可大大提高患者的生命质量。

据病因学，可将胸腔积液大致分为良性胸膜疾病与恶性疾病，肺腺癌胸膜转移在恶性胸腔积液中所占比例较大，患者预期寿命因胸腔积液的出现将显著缩短。胸膜活检是诊断胸膜病变的首选方法，但存在操作难度大，高风险，易产生气胸等并发症的缺点。而许多肿瘤标志物如肺表面活性蛋白A，癌胚抗原等都曾被用于肺腺癌恶性胸腔积液的鉴别诊断，但其敏感性及特异性都较低，难以满足临床的需要。

目前病理检查依旧是诊断肺腺癌的金标准。新版WHO肺肿瘤组织学以形态学为基础，对肺腺癌活检和细胞学小标本的病理诊断要求更加明确。因此，取得合格的病理组织对肺腺癌的早期诊断非常重要。当常规方法不能准确诊断时，应考虑更多侵入性的手术方法如纵隔镜、纵隔切开术、电视辅助胸腔镜手术、纤维支气管镜检查等。然而上述检查创伤大，费用高，检测周期长，部分操作对患者心肺功能要求高，从而限制了适应人群。

因此需要进一步探索一种新的生物标志物可在以提高肺腺癌的早期诊断。该生物标记物需满足：痛苦少，风险小，易操作，无创，快速，低成本，灵敏度、特异性高，可重复的特点。

发明内容

本发明的目的在于，针对现有技术的上述不足，提供了用于检测肺腺癌的标记物、引物组以及试剂盒。

为实现上述目的，本发明采用如下的技术方案：

本发明的第一目的是提供一种用于检测肺腺癌的标记物，所述标记物为miR-4433a-3p，人源miR-4433a-3p的成熟体核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。

本发明的第二目的是提供一种用于检测肺腺癌标记物miR-4433a-3p的引物组，所述检测引物对的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示；反向引物的核苷酸序列如SEQID NO：3所示；所述内参引物对的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示；反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：5所示。

本发明的第三目的是提供上述的引物组在制备检测肺腺癌结节的试剂盒中的应用。

本发明的第四目的是提供上述的引物组在制备检测肺腺癌胸腔积液的试剂盒中的应用。

本发明的第五目的是提供上述的引物组在制备检测肺腺癌术后评估的试剂盒中的应用。