[发明专利]一种羊栖菜来源脂质纳米囊泡的制备方法及其产品与应用

权利要求书

1.一种羊栖菜来源脂质纳米囊泡的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、打碎研磨：清洗羊栖菜，将清洗后的羊栖菜与PBS混合，进行打碎研磨；

S2、差速离心：将打碎研磨后的研磨液进行差速离心，得到差速离心后的上清液；

S3、超速离心：将差速离心后的上清液以4℃、100000-200000g超速离心60-120min，超速离心结束后弃上清，留沉淀；

S4、梯度密度离心：将步骤S3超速离心后的沉淀用PBS重悬，并轻加至浓度梯度从下往上依次为60wt.％、45wt.％、30wt.％、8wt.％的蔗糖梯度溶液最上层，然后以4℃，100000-200000g超速离心60-120min，离心完成后吸取8wt.％和30wt.％蔗糖层之间可见条带，重悬于PBS中，然后再次以4℃，100000-200000g离心60-120min，得到羊栖菜来源脂质纳米囊泡。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S1所述羊栖菜与PBS的质量比为1:5，所述打碎研磨进行3-10次，每次1-5min，两次打碎研磨中间冷藏5-60min；所述打碎研磨的转速为15000-28000rpm，所述冷藏的温度为4℃。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S2所述差速离心的具体操作为：先以1000-2500g离心10-30min，弃沉淀，留上清，然后以3000-8000g离心10-30min，弃沉淀，留上清，最后以10000-30000g离心30-60min，弃沉淀，得到差速离心后的上清液。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S3中所述浓度梯度从下往上依次为60wt.％、45wt.％、30wt.％、8wt.％的蔗糖梯度溶液的制备方法为：先配制浓度分别为8wt.％、30wt.％、45wt.％、60wt.％的蔗糖溶液，然后准备干净超离管，依次加入60wt.％、45wt.％、30wt.％、8wt.％的蔗糖溶液各8ml配成梯度，得到所述蔗糖梯度溶液。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括S5、羊栖菜来源脂质纳米囊泡的保存：将步骤S4中得到的羊栖菜来源脂质纳米囊泡沉淀用PBS重悬，220nm滤膜过滤，得到羊栖菜来源脂质纳米囊泡悬液，-80℃保存。

6.一种根据权利要求1-5任一项所述的方法制备得到的羊栖菜来源脂质纳米囊泡。

7.一种根据权利要求6所述的羊栖菜来源脂质纳米囊泡在制备抗炎药物中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述炎症为LPS诱导的炎症。

9.一种根据权利要求6所述的羊栖菜来源脂质纳米囊泡作为药物载体的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述药物为siRNA药物。