[发明专利]一种分离检测N-芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-苏氨酰-L-苯丙氨酸中手性杂质的方法

权利要求书

1.一种分离检测N-芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-苏氨酰-L-苯丙氨酸中手性杂质的方法，其特征在于，包括：

将手性杂质与N-芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-苏氨酰-L-苯丙氨酸于溶剂中共同溶解，得到澄清透明溶液；

将所述澄清透明溶液作为供试品溶液，以一定的检测手段进行检测，从而将所述N-芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-苏氨酰-L-苯丙氨酸中的手性杂质进行分离检测；

所述一定的检测手段包括：利用LUX-1手性柱作为分离载体，通过高效液相色谱仪，将流动相A和流动相B在不同的时间采用不同的比例混合,以对所述供试品溶液进行洗脱，并采用面积归一化法确定所述供试品溶液中各成分的种类以及每个成分对应的含量。

2.根据权利要求1所述的分离检测N-芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-苏氨酰-L-苯丙氨酸中手性杂质的方法，其特征在于，所述将流动相A和流动相B在不同的时间采用不同的比例混合包括：

以所述LUX-1手性柱作为分离载体，以流动相的流速1.0mL/min为基准，将流动相A和流动相B以40:60的体积比作为初始体积比，对所述流动相A和流动相B的体积比在第一时间段内逐渐进行调整，得到第一体积比；

将所述流动相A和流动相B在第二时间段内由所述第一体积比逐渐调整到第二体积比；

将所述流动相A和流动相B在第三时间段内由所述第二体积比逐渐调整到第三体积比。

3.根据权利要求2所述的分离检测N-芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-苏氨酰-L-苯丙氨酸中手性杂质的方法，其特征在于，所述第一时间段为15分钟，所述第一体积比为20:80；所述第二时间段为15分钟，所述第二体积比为20:80；所述第三时间段为10分钟，所述第三体积比为40:60。

4.根据权利要求1-3任一所述的分离检测N-芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-苏氨酰-L-苯丙氨酸中手性杂质的方法，其特征在于，所述流动相A为0.10％TFA水溶液；所述流动相B为乙腈。

5.根据权利要求4所述的分离检测N-芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-苏氨酰-L-苯丙氨酸中手性杂质的方法，其特征在于，所述一定的检测手段还包括：色谱柱的尺寸为：5μm4.6mm×250mm；柱温为30℃。

6.根据权利要求4所述的分离检测N-芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-苏氨酰-L-苯丙氨酸中手性杂质的方法，其特征在于，所述一定的检测手段还包括：检测波长为220nm，进样体积5μL。

7.根据权利要求4所述的分离检测N-芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-苏氨酰-L-苯丙氨酸中手性杂质的方法，其特征在于，所述溶剂为乙腈。