[发明专利]一种合成多肽类药物的方法

说明书

本发明提供了一种合成多肽类药物的方法。包括以下步骤：(1)氨基酸偶联反应：在反应介质中，非经典固相合成载体和Fmoc‑氨基酸在缩合试剂作用下发生偶联反应，浓缩、沉淀、过滤得到Fmoc‑肽载体；(2)脱Fmoc保护基反应：在脱保护液中，加入Fmoc‑肽载体进行脱保护反应，得到延长的肽载体；(3)重复步骤(1)和(2)，直至连接多肽类药物中所有氨基酸,得到多肽类药物载体；(4)向多肽类药物载体中加入切割液，沉降、离心得到多肽类药物；其中，所述非经典固相合成载体的结构如下式所示：其中，R为正十八烷基。本发明可实现多肽产品的大规模生产，降低生产成本，提高生产效率，减少环境污染，具有降本增效，节能减排，绿色环保的优点。

技术领域

本发明涉及高分子化合物技术领域，尤其涉及一种合成多肽类药物的方法。

背景技术

多肽是一种生物活性物质，由两个或两个以上氨基酸脱水缩合形成若干个肽键，并按照一定的排裂顺序通过肽键结合而成的化合物，涉及生物体内各种细胞功能的生物活性物质的总称，并常常被应用于功能分析、抗体研究、药物研发等领域。

多肽的化学合成方法主要可以分为液相合成法和固相合成法两种，人类对多肽的合成研究，始于液相合成，1902年Emil Fischer首先开始关注多肽合成，但之后的三十年时间里，进展都相当缓慢，直到1932年，Max Bergmann等人开始使用Z(苄氧羰基)来保护α-氨基，多肽的合成才有了一定的进展。多肽的液相合成法合成范围小，一般只适合10个以内的多肽合成，且在合成过程中，还需要对中间体进行提纯，时间长，工作量大。

1963年，Merrifield创立了将氨基酸的C末端固定在不溶性固相载体上，然后在此载体上依次缩合氨基酸→延长肽链→合成多肽的固相合成法(Solid Phase PeptideSynthesis，SPPS)。在多肽的固相合成法中，每步反应后只需简单地洗涤树脂，便可达到纯化目的，克服了经典液相合成法中的每一步产物都需纯化的困难，为之后多肽合成技术的快速发展奠定了基础。随着多肽合成技术和氨基保护技术的发展，多肽的固相合成法迅速取代的液相合成法，成为多肽合成的首选方法。

在多肽的固相合成中，不同的固相合成载体往往应用在不同的固相合成法中，固相合成法可以分为两种，分别是α-氨基用Boc(叔丁氧羰基)保护的Boc固相合成法，和α-氨基用Fmoc(9-芴甲氧羰基)保护的Fmoc固相合成法。20世纪60年代，固相合成法的创建者Merrifield建立了Boc合成法，该合成方法在当时成功地合成了许多生物大分子，如活性酶、生长因子、人工蛋白等，极大地推动了多肽合成的发展。PAM树脂和MBHA树脂最早被应用在在Boc固相合成法中，其对酸非常稳定，往往需要在HF、TFMSA等强酸条件下才能够切割下来，苛刻的裂解条件限制了Boc合成法的发展。1972年，Lou Carpino开始用Fmoc保护基用于保护α-氨基，由于其反应条件温和，较Boc固相合成法存在很多优势，因而迅速得到广泛使用，到了20世纪80年代，Fmoc固相合成法逐步取代了Boc固相合成法，成为了固相多肽合成中的常用合成方法。

但现阶段，多肽的Fmoc固相合成法，仍存在很多问题亟待解决。(1)多肽固相合成载体，经反应介质溶胀后，体积能增长5-10倍，相较于传统的液相合成法，同等的反应规模固相合成法一般需要更大体积的反应器，限制了多肽的规模化生产。(2)多肽的固相合成不适于在普通的反应釜中进行，而需要使用釜底配置筛滤板等特殊设计的固相反应器，增加了设备成本。(3)多肽的固相合成中，偶联反应在非均相中进行，为保证反应完全，反应体系中往往需要加入过量的氨基酸和缩试剂，提高了生产成本。(4)多肽固相合成的最大痛点，是其巨大的洗涤用有机溶剂的使用量，不仅提高了生产成本，更与现行的绿色化学理念相悖。(5)多肽的固相合成法，在氨基酸反复偶联的过程中，因肽链未与树脂裂解，缺少有效的中控手段，难以充分研究每个氨基酸偶联的难易程度及反应过程中可能发生的各种副反应。

发明内容

针对现有技术中所存在的不足，本发明提供了一种非经典固相合成载体及其制备方法与应用，其解决了现有技术中存在的效率低的问题。