[发明专利]非洲猪瘟病毒D129L基因及其在制备复制缺陷型非洲猪瘟疫苗中的应用在审
申请号: | 202310336343.4 | 申请日: | 2023-03-31 |
公开(公告)号: | CN116492456A | 公开(公告)日: | 2023-07-28 |
发明(设计)人: | 扈荣良;张艳艳;朱镕年;陈腾;惠丽丽;周鑫韬;张菲;缪发明;岳慧贤 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 |
主分类号: | A61K39/12 | 分类号: | A61K39/12;A61P31/20;C07K14/01;C12N7/01;C12N15/34;C12N15/85;C12N5/10;C12R1/93 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 董函竹 |
地址: | 100071 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 非洲 猪瘟 病毒 d129l 基因 及其 制备 复制 缺陷 疫苗 中的 应用 | ||
1.蛋白质的应用,其特征在于,所述应用为下述任一种:
A1)在制备复制缺陷型非洲猪瘟疫苗中的应用;
A2)在制备复制缺陷型非洲猪瘟病毒中的应用;
A3)在制备抑制非洲猪瘟病毒复制的产品中的应用;
A4)在制备用于复制缺陷型非洲猪瘟病毒的增殖或培养的产品中的应用;
所述蛋白质为下述任一种:
B1)氨基酸序列是SEQ ID No.2的蛋白质;
B2)将SEQ ID No.2的氨基酸序列经过氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与B1)所示的蛋白质具有80%以上的同一性且具有相同功能的蛋白质;
B3)在B1)或B2)的N端和/或C端连接标签得到的具有相同功能的融合蛋白质。
2.与权利要求1中所述蛋白质相关的生物材料的应用,其特征在于,所述应用为下述任一种:
C1)在制备复制缺陷型非洲猪瘟疫苗中的应用;
C2)在制备复制缺陷型非洲猪瘟病毒中的应用;
C3)在制备抑制非洲猪瘟病毒复制的产品中的应用;
C4)在制备用于复制缺陷型非洲猪瘟病毒的增殖或培养的产品中的应用;
所述生物材料为下述D1)至D6)中的任一种:
D1)编码权利要求1中所述蛋白质的核酸分子;
D2)抑制或降低权利要求1中所述蛋白质的编码基因功能的核酸分子;
D3)含有D1)和/或D2)所述核酸分子的表达盒;
D4)含有D1)和/或D2)所述核酸分子的重组载体、或含有D3)所述表达盒的重组载体;
D5)含有D1)和/或D2)所述核酸分子的重组微生物、或含有D3)所述表达盒的重组微生物、或含有D4)所述重组载体的重组微生物;
D6)含有D1)和/或D2)所述核酸分子的重组细胞、或含有D3)所述表达盒的重组细胞、或含有D4)所述重组载体的重组细胞。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,D1)所述核酸分子为下述任一种:
E1)核苷酸序列是SEQ ID No.1的DNA分子;
E2)编码序列是SEQ ID No.1的DNA分子;
E3)编码序列是SEQ ID No.1的任何遗传密码子简并序列的DNA分子。
4.复制缺陷型非洲猪瘟病毒,其特征在于,所述复制缺陷型非洲猪瘟病毒基因组缺失了权利要求1中所述蛋白质的编码基因,或所述复制缺陷型非洲猪瘟病毒基因组中权利要求1中所述蛋白质的编码基因功能失活。
5.制备复制缺陷型非洲猪瘟病毒的方法,其特征在于,所述方法包括使非洲猪瘟病毒基因组中权利要求1中所述蛋白质的编码基因缺失或功能失活,得到复制缺陷型非洲猪瘟病毒。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
G1)构建含有权利要求1中所述蛋白质编码基因左右同源臂的重组载体;
G2)将G1)中所述重组载体与非洲猪瘟病毒共转染/感染宿主细胞;
G3)培养所述宿主细胞,筛选得到复制缺陷型非洲猪瘟病毒。
7.由权利要求5或6所述的方法制备得到的复制缺陷型非洲猪瘟病毒。
8.权利要求4或7所述复制缺陷型非洲猪瘟病毒的增殖方法,其特征在于,所述方法包括将权利要求4或7所述复制缺陷型非洲猪瘟病毒在辅助细胞中培养,所述辅助细胞为稳定表达权利要求1中所述蛋白质的重组细胞和/或含有权利要求1中所述蛋白质的细胞。
9.权利要求8中所述的辅助细胞,或权利要求8中所述的辅助细胞在制备权利要求4所述复制缺陷型非洲猪瘟病毒中的应用。
10.复制缺陷型非洲猪瘟疫苗,其特征在于,所述复制缺陷型非洲猪瘟疫苗包括权利要求4或7所述的复制缺陷型非洲猪瘟病毒。
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