[发明专利]非洲猪瘟病毒D129L基因及其在制备复制缺陷型非洲猪瘟疫苗中的应用

说明书

本发明公开了非洲猪瘟病毒D129L基因及其在制备复制缺陷型非洲猪瘟疫苗中的应用，属于生物医药技术领域。本发明所要解决的技术问题是如何预防非洲猪瘟。为了解决该技术问题，本发明提供了氨基酸序列是SEQ ID No.2的蛋白在制备复制缺陷型非洲猪瘟疫苗中的应用。本发明发现了一种控制ASFV复制的关键必需基因D129L，将该D129L基因缺失复制缺陷型病毒免疫猪后，用ASFV强毒攻击，免疫猪可获得100％攻毒保护。因此，该基因缺失病毒可作为复制缺陷型非洲猪瘟疫苗，用于非洲猪瘟的预防。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及非洲猪瘟病毒D129L基因及其在制备复制缺陷型非洲猪瘟疫苗中的应用。

背景技术

非洲猪瘟(African Swine Fever，ASF)是由非洲猪瘟病毒(African Swine FeverVirus，ASFV)感染引起的家猪和欧亚野猪的一种热性出血性传染病，发病率和病死率可高达100％，是全球养猪业的头号疫病或首要威胁，可造成重大经济损失。目前全球尚无安全有效的非洲猪瘟疫苗，尽管一些企业或研究机构力推基因缺失活疫苗，但经过临床试用和大面积安全性评价，证明非洲猪瘟病毒基因缺失活疫苗存在重大生物安全问题。因此，安全有效的非洲猪瘟疫苗仍是非洲猪瘟防控面临的重要课题。

非洲猪瘟病毒是一种大的复杂的虫媒DNA病毒，是非洲猪瘟病毒科非洲猪瘟病毒属中的唯一成员。根据其主要衣壳蛋白p72基因3’端核苷酸序列的差异，迄今可将其分为24个基因型。非洲猪瘟病毒的结构由外向内可分为外部囊膜、衣壳、内部囊膜、核心壳和核这5层，病毒基因组长170～193kb，编码蛋白150种以上，其中结构蛋白68种以上。目前尚不清楚非洲猪瘟病毒的保护性抗原为哪种或哪几种，病毒基因组中大部分基因的功能尚不清楚，这种结构和功能上的复杂性和未知性给非洲猪瘟疫苗的研制带来了很大困难。除了上面提到的基因缺失活疫苗存在的生物安全问题以外，目前正在研究的非洲猪瘟疫苗还包括灭活疫苗、亚单位疫苗和重组载体疫苗等，这些疫苗候选株的安全性应该没有太大的问题，但是其效力均尚不如意，迄今没有一种安全有效的疫苗上市。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何预防非洲猪瘟。所要解决的技术问题不限于所描述的技术主题，本领域技术人员通过以下描述可以清楚地理解本文未提及的其它技术主题。

为了解决上述技术问题，本发明首先提供了蛋白质的应用，所述应用可为下述任一种：

A1)在制备复制缺陷型非洲猪瘟疫苗中的应用；

A2)在制备复制缺陷型非洲猪瘟病毒中的应用；

A3)在制备抑制非洲猪瘟病毒复制的产品中的应用；

A4)在制备用于复制缺陷型非洲猪瘟病毒的增殖或培养的产品中的应用；

所述蛋白质可为下述任一种：

B1)氨基酸序列是SEQ ID No.2的蛋白质；

B2)将SEQ ID No.2的氨基酸序列经过氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与B1)所示的蛋白质具有80％以上的同一性(同源性)且具有相同功能的蛋白质；

B3)在B1)或B2)的N端和/或C端连接标签得到的具有相同功能的融合蛋白质。

所述蛋白质可为病毒蛋白，名称为pD129L。

所述蛋白pD129L可来源于非洲猪瘟病毒(African Swine Fever Virus，ASFV)。

进一步地，所述蛋白pD129L可来源于非洲猪瘟病毒SY18株，也可来源于其他非洲猪瘟病毒自然分离株和人工致弱株。

所述蛋白pD129L是非洲猪瘟病毒复制必需的蛋白，缺失该蛋白后病毒不能复制组装成完整的病毒颗粒。所述蛋白pD129L在细胞内具有复制的开关功能。