[发明专利]一种抗原组合物及其应用

权利要求书

1.一种抗原组合物，其特征在于，包括ESAT-6、CFP-10、Mpt83和Ag85B；

所述ESAT-6的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示；

所述CFP-10的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示；

所述Mpt83的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示；

所述Ag85B的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示。

2.根据权利要求1所述抗原组合物，其特征在于，将ESAT-6、CFP-10、Mpt83和Ag85B直接混合；

或，从N端到C端按照ESAT-6、CFP-10、Mpt83和Ag85B的顺序用柔性连接臂顺次连接。

3.融合蛋白ECMA019m的构建方法，其特征在于，将权利要求1中抗原ESAT-6、CFP-10、Mpt83和Ag85B对应的基因片段分别连接至pET-32a质粒，构建ESAT-6、CFP-10、Mpt83和Ag85B重组质粒并转化大肠杆菌DH5α感受态细胞；

优选的，构建的ESAT-6、CFP-10、Mpt83和Ag85B四种工程菌在LB液体培养基中增菌培养后使用异丙基β-d-硫代半乳糖苷诱导重组蛋白表达，通过Ni亲和层析和DEAE离子交换层析技术纯化获得具有生理构象的目的蛋白。

4.编码权利要求1所述抗原组合物的DNA分子，其特征在于，包括SEQ ID NO.1、SEQ IDNO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4中的一项或几项。

5.一种重组菌、重组表达载体或转基因细胞系，其特征在于，包括权利要求4所述DNA分子。

6.一种结核疫苗或结核感染检测及诊断试剂盒，其特征在于，利用权利要求1中的抗原ESAT-6、CFP-10、Mpt83和Ag85B。

7.根据权利要求6所述结核疫苗或结核感染检测及诊断试剂盒，其特征在于，还包括佐剂。

8.根据权利要求7所述结核疫苗或结核感染检测及诊断试剂盒，其特征在于，所述佐剂为氢氧化铝。

9.权利要求1所述抗原组合物在制备预防结核分枝杆菌感染疫苗或治疗结核分枝杆菌感染引起疾病的药物中的应用。

10.权利要求1所述抗原组合物在制备诊断结核分枝杆菌感染或结核分枝杆菌感染引起疾病的试剂中的应用。