[发明专利]一种鉴别5种楠属木材的特异性引物及其鉴别方法和应用

权利要求书

1.一种鉴别5种楠属木材的特异性引物，其特征在于：所述特异性引物为PB958、PCHui831、PS827和PZ805；

所述特异性引物的序列信息如下所示：

2.如权利要求1所述的特异性引物，其特征在于：所述5种楠属木材分别为楠木P.zhennan(PZ)、细叶楠P.hui(PH)、闽楠P.bournei(PB)、紫楠P.sheareri(PS)、浙江楠P.chekiangensis(PC)。

3.一种鉴别5种楠属木材的方法，所述方法利用DNA条形码，并通过分子生物学手段来鉴别5种楠属木材，所述特异性引物为权利要求1所述PB958+PCHui831+PS827+PZ805全部组合形成的DNA条形码；

其特征在于，包括以下步骤：

(1)木材样本的预处理；

(2)提取经(1)处理后的木材样本中的DNA；

(3)以步骤(2)提取得到的DNA为模板，对PB958、PCHui831、PS827和PZ805序列进行PCR扩增；

(4)将步骤(3)得到的PCR扩增产物进行测序，得到PB958、PCHui831、PS827和PZ805的扩增序列，并对其进行分析；

(5)以步骤(4)所得PB958、PCHui831、PS827和PZ805的扩增序列结果通过数据库比对鉴别5种楠属木材。

4.如权利要求3所述的5种楠属木材的鉴别方法，其特征在于：步骤(1)所述的木粉研磨是将木材切成木屑再使用球磨仪进行研磨，样品终尺寸为5微米。

5.如权利要求3所述的5种楠属木材的鉴别方法，其特征在于：步骤(2)中所述DNA使用DNeasyPlantMiniKit(Qiagen，Hilden，Germany)试剂盒提取DNA，DNA终浓度为1～100ng/μL。

6.如权利要求3所述的5种楠属木材的鉴别方法，其特征在于：步骤(3)所述PCR扩增反应体系为ddH₂O19μL，Mix25μL，2μL单一引物、2μL模板DNA；PCR反应条件为98℃预变性2min；98℃变性10s，57℃退火15s，72℃延伸30s，循环35次；72℃终延伸5min。

7.如权利要求3所述的方法在鉴别5种楠属木材中的应用，其特征在于：所述5种楠属木材分别为楠木P.zhennan(PZ)、细叶楠P.hui(PH)、闽楠P.bournei(PB)、紫楠P.sheareri(PS)、浙江楠P.chekiangensis(PC)。