[发明专利]一种鉴别5种楠属木材的特异性引物及其鉴别方法和应用

说明书

本发明公开了一种鉴别5种楠属木材的特异性引物，所述特异性引物为PB958、PCHui831、PS827和PZ805，5种楠属木材分别为楠木P.zhennan(PZ)、细叶楠P.hui(PH)、闽楠P.bournei(PB)、紫楠P.sheareri(PS)、浙江楠P.chekiangensis(PC)。本发明还提供了一种鉴别5种楠属木材的方法。本发明鉴别方法取样方便、操作简单，克服了传统鉴定方法主要依赖于形态鉴定方法，可满足各相关部门对楠属木材快速筛查和鉴定的要求。

技术领域

本发明属于木材材种鉴定的分子生物学检测领域，具体涉及对楠属中多种木材的分子鉴定方法及其所使用的引物。

背景技术

楠木是我国传统珍贵树种，素有“木中金子”之称，其材质通直圆满、纹理美观、结构细致、质韧难朽、奇香不衰，是建筑、家具、雕刻和精密木模的上等良材。楠木是典型的成林树种，古往今来倍受人们青睐，更是明清两代帝王必用的“皇木”。历史上，楠木为江南四大名木(楠、樟、梓、稠)之冠，人为采伐十分严重，使许多种类沦为濒危或渐危种。根据《中国植物红皮书—稀有濒危植物名录》(第1册)和2021年国务院批准公布的《国家重点保护野生植物名录》(第2批)，楠属的楠木Phoebe zhennan、闽楠P.bournei、浙江楠P.chekiangensis等均为渐危种，为国家Ⅱ级保护植物。根据GB/T 16734-1997《中国主要木材名称》规定，楠木是指樟科的桢楠属Phoebe的树种。桢楠属树种在中国约有35种，分布于长江流域以南，尤以西南最为常见。

目前，“金丝”楠木仍旧是消费者和家具生产厂商追求的名贵木材之一，具有很大的商业价值。随着金丝楠木市场消费的高涨，买卖双方的纠纷也日渐凸显，在木材尤其是家具、工艺品等民事纠纷和刑事案件中买方对于金丝楠木的鉴定需求较为迫切。为维护消费者合法利益，规范木材贸易市场，以及保护生态环境，对木材进行科学、准确地识别势在必行。

传统的木材识别方法建立在木材解剖学基础上，主要通过木材宏观和微观特征相结合的方法实现，但操作过程复杂、耗时较长，对专业知识要求高，且一般只能识别到“属”或“类”，这就为木材鉴定工作带来了一定的局限性。所以要解决楠木难以鉴定到种的现实困境还须借助其他的方法。分子生物学方法正是解决该困境的突破技术。

发明内容

本发明要解决的技术问题是：针对传统木材识别技术无法准确鉴别5种楠属木材。所以，本发明的第一目的是提供一种鉴别5种楠属木材的特异性引物。本发明的第二目的是提供一种鉴别5种楠属木材的方法。本发明的第三目的是提供所述特异性引物和分子生物学方法在鉴别5种楠属木材中的应用。

本发明所采用的技术方案如下：

一种鉴别5种楠属木材的特异性引物，所述特异性引物为PB958、PCHui831、PS827和PZ805。所述PB958、PCHui831、PS827和PZ805的引物序列信息如表2所示。

优选地，所述5种楠属木材分别为楠木P.zhennan(PZ)、细叶楠P.hui(PH)、闽楠P.bournei(PB)、紫楠P.sheareri(PS)、浙江楠P.chekiangensis(PC)。

另外，本发明提供了一种鉴别5种楠属木材的方法，该方法利用DNA条形码，并通过分子生物学手段来鉴别5种楠属木材；所述特异性引物是PB958+PCHui831+PS827+PZ805全部组合形成的DNA条形码。

具体地，所述方法包括以下步骤：

(1)木材样本的预处理；

(2)提取经(1)处理后的木材样本中的DNA；

(3)以步骤(2)提取得到的DNA为模板，对PB958、PCHui831、PS827和PZ805序列进行PCR扩增；