[发明专利]一种UBE3B突变基因、检测试剂盒、方法

权利要求书

1.检测引发Kaufman眼脑面综合征的突变基因的试剂在制备Kaufman眼脑面综合征检测的试剂盒中的应用，所述突变基因携带两个突变位点分别为：

UBE3B基因的第13号内含子的第1283位碱基的上游第6位碱基由T突变为G，具体信息为：UBE3B:NM_130466.4:intron13:c.1283-6TG；

UBE3B基因转录本的第9号外显子缺失第649~653位碱基后，使UBE3B基因转录本的第9号外显子编码蛋白的第217位氨基酸由亮氨酸移码突变为赖氨酸，且编码蛋白的氨基酸序列在第272位发生提前终止，具体信息为：UBE3B:NM_130466.4:exon9:c.649_653del:p.L217Kfs*55。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述试剂盒包括用于扩增所述突变基因携带的两个突变位点的引物对。

3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述试剂盒包括用于扩增所述突变基因携带的两个突变位点的引物对和Taq DNA聚合酶。

4.如权利要求2或3所述的应用，其特征在于，所述引物对的核苷酸序列如SEQ IDNO.1-4所示。

5.如权利要求2或3所述的应用，其特征在于，所述试剂盒还包括dNTPs、Taq酶、Mg²⁺和PCR反应缓冲液。

6.如权利要求2或3所述突变基因的检测方法，其特征在于，所述方法包括：

1)提取样本基因组DNA；

2)通过PCR扩增UBE3B基因组序列和UBE3B基因第9号外显子区域；

3)DNA测序；

4)将待检测样本DNA测序结果与正常人基因组DNA序列比对，判断UBE3B基因的第13号内含子区是否存在c.1283-6TG的单核苷酸碱基突变，将待检测样本DNA测序结果与UBE3B基因转录本序列比对，判断UBE3B基因转录本的第9号外显子的第649~653位碱基是否缺失；

所述检测方法不用于疾病的诊断和治疗目的。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述PCR的反应条件为：95℃变性5 min，以95℃ 30s, 57℃ 30 s, 72℃ 90s循环35次；72 ℃ 5 min。