[发明专利]一种中药复方UPLC指纹图谱的建立、指纹图谱及应用

说明书

本发明以甘草泻心汤水溶性部位制备供试品溶液，取甘草、黄芩、干姜、大枣、半夏和黄连对照品混合形成对照品溶液，以体积分数为0.4%的甲酸水溶液为流动相A，乙腈为流动相B，通过UPLC色谱条件进样获得色谱，通过系统分析获得UPLC指纹图谱。本发明通过从甘草泻心汤全方中提纯水溶性部位并建立对应的UPC指纹图谱，结果表明，本发明提供的UPLC指纹图谱具有优异的重现性、精准性，具有46个共有峰，可以全面检测其药效，用于抗炎、抑菌药效检测时能精准、高效检测其药物效果，把控甘草泻心汤用于抗炎及抑菌时的药效的精准。

技术领域

本发明涉及药剂成分检测技术领域，具体涉及一种中药复方UPLC指纹图谱的建立、指纹图谱及应用。

背景技术

甘草泻心汤由甘草、黄芩、干姜、半夏、大枣和黄连组成的中医方剂名，具有益气和胃，消疲止呕功效，临床常用于急慢性胃肠炎症、白塞氏综合症等。为了对其药物质量进行有效监控，必须对其药物成分进行鉴别，以及其中的有效组分进行测定。利用指纹图谱技术检测药物组分成为较为高效便捷的质量检测的方法。

超高效液相色谱(UPLC)是对中药提取溶液进行液相色谱分析，通过图谱中表征中药特定组分的图谱特定峰线及其组合，以形成该中药特有的指纹图谱，从而完成对中药制剂的质量检测或监控。UPLC借助于HPLC(高效液相色法)的理论及原理，增加了分析的通量、灵敏度及色谱峰容量，充分利用了传统HPLC不具备的小粒度色谱柱的优势，使色谱分离的解析度达到新的高度。

基于此，将色谱和质谱联用，将色谱的分离能力与质谱的定性功能结合起来，实现对复杂混合物更为准确的定量和定性的分析，通过优势互补，更为精准的检测药物质量。

发明内容

本发明目的在于提供一种甘草泻心汤的UPLC指纹图谱，通过甘草泻心汤提取纯化后，建立其水溶性部位的UPLC指纹图谱，为甘草泻心汤中各药材成分的有效性、稳定性，确保其能有效检测对应药效。

本发明目的在于提供上述甘草泻心汤的UPLC指纹图谱的建立方法。

本发明目的在于提供上述甘草泻心汤的UPLC指纹图谱的应用。

本发明目的通过如下技术方案实现：

一种中药复方UPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)供试品溶液的制备

按照甘草泻心汤处方药材，取甘草20g，黄芩15g，干姜15g，大枣12g，半夏13g，黄连5g，称取16批次，采用半仿生提取法提取样品母液，取样品母液20mL，加入乙酸乙酯溶剂20mL，通过萃取瓶振摇5min，静置10min，取下层溶液经连续3次萃取，合并3次萃取液，萃取液在55℃下旋转蒸干，用质量分数为50％的甲醇溶液定容至20mL，得到水溶性部位样品溶液，用0.45μm滤膜滤过，得供试品溶液；

(2)对照品溶液的制备

选择甘草苷，黄芩苷，汉黄芩苷，盐酸黄连碱，甘草素，甘草酸铵，盐酸小檗碱混合后，以甲醇溶解至浓度为1.0mg/mL，作为对照品溶液；

(3)UPLC色谱条件