[发明专利]分泌抗鱼类CD28单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用

权利要求书

1.一株分泌抗鱼类T淋巴细胞表面膜蛋白CD28单克隆抗体的杂交瘤细胞株1B6A2，杂交瘤细胞株1B6A2保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCCNO：C202291，保藏日期为2022年5月5日。

2.一种权利要求1所述杂交瘤细胞株1B6A2的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

采用含有鱼类T淋巴细胞表面膜蛋白CD28基因的慢病毒对细胞进行感染；

将感染后的细胞作为免疫原进行动物免疫；

动物免疫后进行细胞融合、细胞筛选和克隆，以获得所述杂交瘤细胞株1B6A2。

3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，包含有鱼类T淋巴细胞表面膜蛋白CD28基因的慢病毒的制备过程包括：采用包含有鱼类T淋巴细胞表面膜蛋白CD28基因的质粒对细胞进行转染，以获得含有慢病毒的上清。

4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述细胞包括鱼类CD28转染的HEK-293T细胞。

5.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，采用包含有鱼类T淋巴细胞表面膜蛋白CD28基因的慢病毒对MEF细胞进行转染。

6.一种权利要求1中所述杂交瘤细胞株1B6A2分泌的抗鱼类T淋巴细胞表面膜蛋白CD28单克隆抗体。

7.一种如权利要求6所述的单克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

取小鼠，腹腔注射无菌石蜡油；

取权利要求1中所述的杂交瘤细胞株1B6A2进行重悬，然后对小鼠进行腹腔注射；

处死小鼠，采集腹水并离心，分装保存；

对腹水进行纯化，以获得所述抗鱼类T淋巴细胞表面膜蛋白CD28单克隆抗体。

8.一种如权利要求6所述的单克隆抗体在鱼类适应性免疫应答研究中的应用。

9.一种如权利要求6所述的单克隆抗体在特异性识别鱼类CD28蛋白中的应用。

10.一种如权利要求6所述的单克隆抗体在模拟第二信号激活鱼类T细胞中的应用。

11.一种如权利要求6所述的单克隆抗体在模拟第二信号，并联合第一信号诱导鱼类T细胞增殖的应用。

12.一种如权利要求6所述的单克隆抗体在制备鱼病防治试剂/药物中的应用。

13.如权利要求12所述的应用，其特征在于，所述鱼病防治试剂/药物包括鱼病防治疫苗。