[发明专利]用于角膜营养不良的基因检测试剂、试剂盒在审
| 申请号： | 202310444713.6 | 申请日： | 2023-04-24 |
| 公开（公告）号： | CN116426634A | 公开（公告）日： | 2023-07-14 |
| 发明（设计）人： | 于晓光;吴文辉;李小玲 | 申请（专利权）人： | 温州谱希基因科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6883 | 分类号： | C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12Q1/6806;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京精金石知识产权代理有限公司 11470 | 代理人： | 杨佩佩 |
| 地址： | 325000 浙江省温州市龙湾*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 角膜 营养不良 基因 检测 试剂 试剂盒 | ||
1.一种用于角膜营养不良的基因检测试剂盒，包括血液样品前处理试剂和扩增试剂，其特征在于，所述的血液样品前处理试剂中包括：1-50mM Tris，1-20mM异硫酸氰胍，20-80mM月桂醇，300-500mM赤藓糖醇，中性蛋白酶5000-8000U/mL，余量为水，pH为6.5-7.5；所述的扩增试剂中包括扩增引物和探针。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述的前处理试剂中包括：20-40mMTris，10-20mM异硫酸氰胍，20-60mM月桂醇，400-500mM赤藓糖醇，中性蛋白酶5000-6000U/mL。
3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述的前处理试剂中包括：25mM Tris、10mM异硫酸氰胍、50mM月桂醇、500mM赤藓糖醇、中性蛋白酶5000U/mL。
4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，直接用于血样扩增检测。
5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述的扩增引物和探针用于检测TGFβI基因突变：c.370CT(rs121909210)、c.371GT/A(rs121909211)、c.1663CT(rs121909208)和c.1664GA(rs121909209)。
6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述的扩增引物为SEQ ID NO.1-4，所述的探针为SEQ ID NO.5-12。
7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，还包括PCR扩增用缓冲体系，所述的缓冲体系中包括：100mM Tris-HCl，10-15mM MgCl2，20-30mM KCl，20-50mM冰乙酸。
8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述的PCR扩增用缓冲体系中包括：100mM Tris-HCl，14mM MgCl2，22mM KCl，25mM冰乙酸。
9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，还包括其他用于PCR反应的试剂，如：DNA聚合酶、dNTPs和质控品。
10.根据权利要求9所述的试剂盒，其特征在于，还包括阳性质控品和阴性质控品。
11.一种血样前处理试剂，其特征在于，包括：1-50mM Tris，1-20mM异硫酸氰胍，20-80mM月桂醇，300-500mM赤藓糖醇，中性蛋白酶5000-8000U/mL，余量为水，pH为6.5-7.5。
12.用于检测角膜营养不良的扩增引物和探针的混合物，其特征在于，扩增引物为SEQID NO.1-4，探针为SEQ ID NO.5-12。
13.权利要求11所述的血样前处理试剂和权利要求12所述的混合物在制备检测角膜营养不良的试剂盒中的应用。
14.根据权利要求13所述的试剂盒，其特征在于，为血样检测试剂盒。
15.根据权利要求14所述的试剂盒，其特征在于，还包括其他用于PCR扩增的试剂，如：DNA聚合酶、阳性质控品、阴性质控品、dNTPs。
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