[发明专利]一种艾地骨化醇有关异构体杂质D的制备方法、检测方法和应用

权利要求书

1.一种艾地骨化醇杂质D的制备方法，其特征在于，所述杂质D结构式如下：

所述的制备方法反应路线如下：

所述的制备方法步骤如下：

(1)以式1化合物为原料，经光化学反应，在式1化合物的1-位和10-位发生异构，得到含杂质D的粗品；

(2)将步骤(1)所得的样品溶解后，采用DAC-50动态轴向压缩制备柱色谱系统对粗品进行制备分离和纯化，得杂质D粗品；

(3)将杂质D粗品通过重结晶，得到杂质D。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中将式1化合物溶于四氢呋喃中，不加光敏剂蒽，加入三乙胺，在氮气保护下，500W高压紫外汞灯照射下进行光化学反应得到杂质D的粗品。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中采用DAC-50动态轴向压缩制备柱色谱系统对粗品进行制备分离和纯化，取粗品溶液进样，洗脱剂为乙腈和水的混合溶液，其中乙腈和水的体积比为：乙腈/水＝55/45，流速：80ml/min，波长：265nm。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中采用重结晶溶剂为乙酸乙酯，杂质D粗品与乙酸乙酯的投料比为1:40。

5.权利要求1-4任一项所述制备方法在药物工艺研究中的应用，其可用于艾地骨化醇杂质研究。

6.一种检测艾地骨化醇原料药中杂质D的方法，具体包括以下步骤：

(1)样品配制：

供试品溶液：取本品约3mg，置10ml量瓶中，加2ml甲醇振摇使溶解，加稀释剂稀释至刻度，摇匀；

对照溶液：精密量取供试品溶液1ml，置20ml量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，摇匀；再精密量取1ml，置10ml量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，摇匀；

系统适用性溶液：取杂质D对照品1mg，置50ml量瓶中，加甲醇振摇使溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取3ml，置10ml量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，摇匀，作为杂质储备液；取艾地骨化醇对照品3mg，置10ml量瓶中，先加2ml甲醇振摇使溶解，精密加入杂质储备液1ml，再加稀释剂稀释至刻度，摇匀。

(2)色谱条件设置：

色谱柱：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；

流速：0.5～1.1ml/min；

柱温：20～40℃；

波长：260～270nm；

进样量：30～50μl；

流动相：以乙腈流动相A，以水为流动相B进行梯度洗脱；

(3)检测：

精密量取上述溶液各50μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按照面积归一化法计算样品中杂质D含量。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤(1)中稀释剂为80％甲醇溶液。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤(2)中色谱柱型号为：YMC-Pack ODS-AM，4.6mm×150mm，3μm。

9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤(2)中按照下表进行梯度洗脱：

10.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤(2)中流速设置为1.0ml/min；柱温设置为30℃；波长设置为265nm；进样量为50μl。