[发明专利]一种防治油茶叶斑病的菠萝皮酵素及其应用

说明书

本发明涉及一种具有抑制油茶叶斑病的菠萝皮酵素及其制备方法和应用。通过将菠萝皮原料粉碎，与红糖、水按比例混合后发酵制得菠萝皮酵素。采用生长抑制法、平板对峙实验和小区实验验证了菠萝皮酵素对引起湘中地区油茶叶斑病的病原菌葡萄座腔菌具有显著的抑制效果，丰富了农用酵素的应用领域和油茶无公害的防治措施，同时农业废弃物资源的循环利用提供了新的解决思路。

技术领域：

本发明属于农业生产中作物防病治病技术领域，具体涉及一种菠萝皮酵素在防治由葡萄座腔菌引起的油茶叶斑病中的应用

背景技术：

油茶(Camellia oleiferaAbel.)属山茶科山茶属，常绿小乔木或灌木，是世界四大木本油料树种之一，在我国已有2000多年的种植和栽培历史，是我国特有的优质木本食用油料植物。它适应性广、抗逆性强，适种于广大的红壤丘陵地区。油茶主要生长在南方，以湖南、江西、广西为主，其中湖南省是我国最大的油茶产地和最大的茶油消费区。据统计，湖南省油茶林总面积约占全国三分之一；油茶籽产量约占全国一半；综合产值约占全国五分之二。但油茶的病害种类繁多，其危害程度也愈发严重。每年因病害而造成的经济损失难以估计，仅湖南省油茶产区发生的病害多达37种，危害严重，引起落蕾、落果、枝梢枯死，甚至整株衰弱死亡。

在油茶种植过程中，叶斑病是常见的一种病害，严重影响油茶的正常生长和油茶产量。目前已报道的引起叶斑病的病原菌有可可毛色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)、小孢拟盘多毛孢(Pestalotiopsismicrospora)、茶拟盘多毛孢菌(Pestalotiopsis theae)等。本发明人通过采集双峰县油茶基地油茶叶斑病病样17份，采用组织分离法对油茶病叶进行分离、纯化，结合形态学特征、rDNA-ITS、EF-1α基因进行鉴定，利用离体菌饼贴接法进行致病力测定，确定油茶叶斑病的病原菌为葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)。

农用植物酵素是微生物利用植物源有机废弃物发酵而成的发酵液，富含营养成分、代谢活性物质与有益微生物菌群，是具有多元复合功能的生态产品。农用植物酵素是一种富集本地有益微生物和处理当地有机废弃物的一项简单易行的方法，用于农业生产，不仅能够防病治虫、促进植物生长、提高作物品质，还有利于改善土壤生态、缓解环境污染等，有良好的综合生态效应。

菠萝皮渣是菠萝加工产生的副产物，约占总重量的50％～60％。菠萝皮中富含总糖、有机酸、蛋白酶、酚类、黄酮类化合物等多种生物活性物质。由其制成的酵素液可以改善土壤理化性质，增强土壤肥力，防治病虫害等，是发展有机农业、减少化学农药污染的理想方法，目前利用菠萝皮酵素来防治油茶叶斑病鲜有报道。

发明内容：

本发明的目的是针对现有技术的空白，提供一种由葡萄座腔菌引起的油茶叶斑病的防治方法，主要涉及将菠萝皮酵素用于油茶叶斑病的防治，原料来源丰富，对油茶叶斑病有较好的抑菌效果，实现了对油茶的无公害防治。

本发明的目的是通过以下方式实现的：

一种高效防治由葡萄座腔菌引起的油茶叶斑病的菠萝皮酵素的制备方法，其特征在于：将菠萝皮原料洗净沥干切碎后，与红糖、水按照质量比3：1：10混合装入塑料容器中，搅拌使所述菠萝皮原料与红糖、水充分混合，放置于避光处进行发酵，第一个月每天放气、搅拌，使物料充分混合，发酵充分，之后在常温下密闭自然发酵6个月，过滤，得菠萝皮酵素。

所述菠萝皮收集于娄底市农贸市场果蔬店。

所述菠萝皮酵素中含有拮抗细菌枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和拮抗真菌哈茨木霉菌(Trichoderma harzianum)。

所述菠萝皮酵素pH值为3.56±0.02，外观清澈透亮、呈浅棕色，有菠萝香味，酵素液放置几天后表面长出一层薄薄的白膜。

所述菠萝皮酵素中含有多种有机酸，所述有机酸包括乙酸、乳酸、苹果酸、草酸、莽草酸、马来酸、柠檬酸。