[发明专利]一株梯棱羊肚菌单孢杂交菌株JYN04及其选育和应用

说明书

本发明提供了一株梯棱羊肚菌单孢杂交菌株JYN04及其选育和应用，属于菌种选育技术领域。本发明通过单个子囊孢子进行培养，得单孢菌株群体；挑选性状优于所述亲本菌株的单孢菌株为候选亲本菌株，将只含有Mat1‑1‑1基因型和只含有Mat1‑2‑1基因型的候选亲本菌株配对杂交得杂交子，对亲本菌株和所述候选杂交子菌株进行栽培试验和农艺性状考评，选择产量、农艺性状和抗性优于亲本的候选杂交子，最终获得了所述梯棱羊肚菌单孢杂交菌株JYN04。JYN04菌株与亲本菌株相比，抗病能力、成熟子囊果重和平均产量有显著提高。

技术领域

本发明涉及菌种选育技术领域，尤其涉及一株梯棱羊肚菌单孢杂交菌株JYN04及其选育和应用。

背景技术

羊肚菌(Morchella spp.)是一种名贵的珍稀食用菌，味道鲜美、口感脆嫩，还兼具良好的抗肿瘤、抗癌、抗疲劳、抗氧化、提高免疫力等药用价值，深受美食爱好者的青睐。梯棱羊肚菌的典型特征的子囊果呈锥形或宽圆锥形，菌盖整体颜色为棕黄色或棕灰色，菌盖表面的凹坑垂直排列，纵横脊明显，呈梯格状，像梯子一样而得名，目前的羊肚菌商业菌株多通过野生菌株的驯化而来，存在着抗病能力差、产量低的缺陷。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一株抗病能力强、产量高的梯棱羊肚菌单孢杂交菌株JYN04。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一株梯棱羊肚菌单孢杂交菌株JYN04，该菌株保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为武汉大学，保藏日期为2023年2月21日，保藏编号为CCTCC NO：M2023171。

本发明提供了所述梯棱羊肚菌单孢杂交菌株JYN04在羊肚菌栽培生产中的应用。

本发明还提供了所述梯棱羊肚菌单孢杂交菌JYN04的选育方法，包括以下步骤：(1)选取野生梯棱羊肚菌，对菌柄部位进行组织分离，获得纯培养，将纯培养后的菌株作为亲本；

(2)获取所述亲本的子囊孢子；

(3)挑取单个子囊孢子进行培养，待子囊孢子萌发至1～1.5cm直径的菌落时，取菌丝尖端至新的培养基，得单孢菌株群体；

(4)挑选性状优于所述亲本菌株的单孢菌株为候选亲本菌株；

(5)对亲本、单孢菌株进行交配型基因检测；

(6)分别选取只含有Mat1-1-1基因型和只含有Mat1-2-1基因型的候选亲本菌株；将只含有Mat1-1-1基因型和只含有Mat1-2-1基因型的候选亲本菌株配对杂交得杂交子；

(7)选取菌落形态均匀、菌核均匀、14天培养无色素，继代培养寿命大于2400小时的杂交子为候选杂交子；

(8)对亲本菌株和所述候选杂交子菌株进行栽培试验和农艺性状考评，选择产量、农艺性状和抗性优于亲本的候选杂交子，为梯棱羊肚菌单孢杂交菌JYN04。

(9)对杂交子与亲本菌株通过拮抗和SRAP分子标记扩增试验，验证其为不同于亲本菌株的新杂交菌株。

优选的，步骤(2)中获得所述子囊孢子的方法为：通过常规的大田栽培获得亲本菌株的成熟子囊果，将所述的子囊果悬挂在培养皿上方3～5cm处，10～12h后，在培养皿中获得所述子囊孢子。

优选的，步骤(3)中所述培养为倒置培养，培养温度为22～25℃，培养时间为2～3天。

优选的，步骤(4)中候选亲本的性状为：24℃恒温培养14天不产生棕色、浅棕色或棕黄色色素，菌落颜色为白色，培养5-7天开始产生菌核，菌核密度随着培养时间延长而增大增多，且候选优良菌株的菌丝寿命均大于2400小时，总生长距离大于150cm。