[发明专利]一种产γ-氨基丁酸的植物乳杆菌、助睡眠益生菌组合物及其制备方法

权利要求书

1.一种产γ-氨基丁酸的植物乳杆菌FPHC0500，其特征在于，所述植物乳杆菌FPHC0500分类命名为植物乳杆菌Lactobacillus plantarum，保藏编号为CGMCC NO.26761，保藏日期为2023年3月6日，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编：100101。

2.根据权利要求1所述产γ-氨基丁酸的植物乳杆菌FPHC0500，其特征在于，所述植物乳杆菌FPHC0500的16S rDNA序列如SEQ ID No.1所示。

3.根据权利要求1所述产γ-氨基丁酸的植物乳杆菌FPHC0500，其特征在于，所述植物乳杆菌FPHC0500为革兰氏阳性菌，菌体呈短杆状，成单、成对或者成链，在MRS培养基上菌落呈圆形，边缘整齐，乳白色，表面湿润光滑，不产生色素。

4.含有权利要求1-3任一项所述植物乳杆菌FPHC0500的微生物制剂。

5.如权利要求1-3任一项所述的植物乳杆菌FPHC0500在微生物发酵制备γ-氨基丁酸中的应用。

6.如权利要求1-3任一项所述的植物乳杆菌FPHC0500在制备助睡眠产品中的应用。

7.一种助睡眠益生菌组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1.将茯苓和百合分别洗净，干燥，粉碎，制得中药粉，将中药粉加入水中，加热煮沸提取，过滤，滤渣留用，干燥，得到水提取物；

S2.将步骤S1中的滤渣加入乙酸乙酯-乙醇-丙酮混合溶剂中，加热提取，过滤，滤渣洗涤，干燥，得到干滤渣，滤液减压除去溶剂，干燥，制得有机提取物；

S3.将权利要求1所述产γ-氨基丁酸的植物乳杆菌FPHC0500接种至高氏培养基中，活化培养，制得菌种种子液；

S4.将步骤S2中的干滤渣加入无菌水中，加入添加剂，灭菌，接种步骤S3制得的植物乳杆菌FPHC0500菌种种子液，发酵培养，冷冻干燥，制得发酵产物；

S5.将聚乙烯醇和羟甲基壳聚糖溶于水中，加入步骤S4中的发酵产物，搅拌混合均匀，加入β-甘油磷酸钠和金属盐溶液，搅拌反应，冷冻干燥，粉碎，得到缓释体系，与步骤S1制得的水提取物、步骤S2制得的有机提取物混合均匀，制得助睡眠益生菌组合物。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，步骤S1中所述茯苓和百合的质量比为10-15:7-12，所述中药粉和水的固液比为1:5-10g/mL，所述提取的时间为2-3h，步骤S2中所述乙酸乙酯-乙醇-丙酮混合溶剂中乙酸乙酯、乙醇和丙酮的体积比为3-5:5-7:1-2，所述滤渣和乙酸乙酯-乙醇-丙酮混合溶剂的固液比为1:3-5g/mL，所述加热提取的温度为50-70℃，时间为1-2h，步骤S3中所述活化培养的条件为缺氧条件下，37-39℃，50-70r/min，活化培养12-18h，所述菌种种子液的含菌量为10⁸-10⁹cfu/mL。

9.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，步骤S4中所述干滤渣、无菌水、添加剂的质量比为10-12:100:5-10，所述添加剂的组成为：氯化钠、氯化铵、尿酸、葡萄糖、维生素B1、维生素B6、氯化钙，质量比为1-2:2-4:1-2:3-5:0.1-0.2:0.2-0.3:0.1-0.2，所述植物乳杆菌FPHC0500菌种种子液的接种量为2-3％，所述发酵培养的条件为缺氧条件下，37-39℃，50-70r/min，活化培养38-48h，步骤S5中所述金属盐为氯化钙或氯化铝，所述聚乙烯醇、羟甲基壳聚糖、发酵产物、β-甘油磷酸钠和金属盐的质量比为7-10:5-7:6-8:2-3:0.5-1，所述缓释体系、水提取物、有机提取物的质量比为10-12:3-5:2-3。

10.一种如权利要求7-9任一项所述的制备方法制得的助睡眠益生菌组合物。