[发明专利]一种测定左羟丙哌嗪原料、胶囊、片剂中所包含物质的方法

说明书

本发明公开了一种测定左羟丙哌嗪原料、胶囊、片剂中所包含物质的方法，所述方法包括：(1)以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；(2)吸取预定量的左羟丙哌嗪原料胶囊配置成待测品溶液；(3)供试品溶液与对照品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪；(4)以磷酸盐缓冲液为第一流动相A，甲醇为第二流动相B，加入到液相色谱仪中进行梯度洗脱；(5)利用液相色谱仪对供试品溶液与对照品溶液分别进行色谱检测。本发明方法通过对实验条件进行摸索优化，增强对小极性杂质的洗脱能力，实现对现有方法无法检出的小极性杂质的检验，主峰与相邻杂质分离最佳，峰形佳，检出杂质峰个数与杂质量均为最多。

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，具体而言，涉及一种用于分析左羟丙哌嗪胶囊/片/原料所含杂质的方法。

背景技术

《中国药典》2020年版二部、欧洲药典EP10.0版与韩国药典10版均有收载左羟丙哌嗪，比较发现三国药典均采用反向液相色谱法控制有关物质项。三国药典系统适用性要求基本相同，中国药典与欧洲药典色谱条件相同，有关物质控制已知杂质均为苯基哌嗪，杂质控制限度有差异，苯基哌嗪为0.1％～0.5％、其他单个杂质为0.1％、杂质总量为0.2％～0.6％；《中国药典》2020年版二部收载了左羟丙哌嗪片与左羟丙哌嗪胶囊，色谱条件与系统适用性要求均与其收载的左羟丙哌嗪一致，杂质控制限度为苯基哌嗪0.2％、其他单个杂质0.2％、杂质总量为0.5％。

按《中国药典》方法考察左羟丙哌嗪胶囊有关物质时发现，供试品色谱图中主成分8倍保留时间处存在未知杂质色谱峰，含量约为0.05％，但该检测方法仅要求记录至主成分3倍保留时间，存在漏检杂质的情况，详见图1。

按《中国药典》方法考察左羟丙哌嗪胶囊薄层鉴别时发现，薄层板中除主成分斑点于溶剂前沿有一明显杂质斑点，提示药品中存含量较高的杂质，详见图2。查阅相关文献几乎没有左羟丙哌嗪及制剂有关物质报道，发现现行药典方法无法检测出左羟丙哌嗪胶囊中部分杂质，不能有效的控制左羟丙哌嗪质量，用药安全不能保障。

鉴于左羟丙哌嗪的合成工艺特点与市售左羟丙哌嗪胶囊质量现状，为了保证对左羟丙哌嗪原料与制剂研发和生产质量的有效质量控制，保障药品安全有效，迫切需要提供一种测定左羟丙哌嗪原料药与制剂有关物质的方法。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的发明人进行了无数次检测实验，最终获得了一种测定左羟丙哌嗪原料药与制剂有关物质的方法，该检测方法检测精度高，可用于左羟丙哌嗪原料药与制剂的有关物质检测，准确可靠，专属性强，省时省力，易于操作，能够检测出现有检测方法无法检测出的杂质成分。

具体而言，本发明提供一种测定左羟丙哌嗪原料、胶囊、片剂中所包含物质的方法，其特征在于，所述方法包括：

(1)以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；

(2)吸取预定量的左羟丙哌嗪原料胶囊配置成待测品溶液；

(3)供试品溶液与对照品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪；

(4)以磷酸盐缓冲液为第一流动相A，甲醇为第二流动相B，加入到液相色谱仪中进行梯度洗脱；

(5)利用液相色谱仪对供试品溶液与对照品溶液分别进行色谱检测。

优选地，进行梯度洗脱时，流动相与洗脱时间的梯度变化如下：0-10分钟，流动相A-流动相B(80∶20)等度洗脱；10-35分钟，流动相A的比例从80％逐步降至40％、流动相B的比例从20％逐步增至60％；35-36分钟，流动相A的比例从40％逐步增至80％、流动相B的比例从60％逐步降至20％；36-50分钟，流动相A-流动相B(80∶20)等度洗脱。

优选地，进行梯度洗脱时，磷酸盐缓冲液中磷酸二氢钾的浓度0.034％。

优选地，进行梯度洗脱时，磷酸盐缓冲液用磷酸调pH值至2.5。