[发明专利]一种提高紫花苜蓿耐盐的方法

说明书

本发明提供一种提高紫花苜蓿耐盐的方法，涉及生物繁育领域，包括：S1、供试菌株、Cp2‑EPS及紫花苜蓿品种，S2、根瘤菌耐盐性测定S3、种子处理及培养液制备，S4、种子萌发试验，S5、幼苗生长试验，S6、指标测定，所述S3步骤中多种不同浓度的Cp2‑EPS混合溶液为五种，本发明中桃色欧文氏菌Cp2胞外多糖和根瘤菌联合接种具有缓解盐胁迫的功能，具体而言，0.6～1.5g/LCp2菌株的胞外多糖、根瘤菌和联合接种均可缓解有50mmol/LNaCl胁迫对紫花苜蓿产生的不利影响，并促进紫花苜蓿种子萌发和幼苗生长，进一步通过Topsis综合分析得出联合接种均产生显著交互作用，其中1.2g/L的Cp2菌株的胞外多糖和根瘤菌联合接种对该盐浓度下紫花苜蓿的缓解效果最好。

技术领域

本发明涉及生物繁育领域，尤其涉及一种提高紫花苜蓿耐盐的方法。

背景技术

全球范围内盐度是限制作物生产力最残酷的环境因素之一，其负面影响会导致作物产量损失65％，超过10％的可耕地和25％-30％的灌溉土地受到不同程度的影响，且盐渍化土地面积日益增加，盐度还会降低土壤微生物多样性和相对丰度，对微生物和植物间相互作用产生不利影响，也是间接造成作物耐盐性降低和减产的重要原因。

紫花苜蓿(MedicagosativaL.)是一种多年生豆科牧草，因其营养丰富和具有良好的生态价值，在全球各大洲的80多个国家广泛种植，面积超过3500万公顷，相比其他牧草，紫花苜蓿具有较好的抗逆性，在中国西北部的矿区、退化草地和盐碱地广泛种植，因此，如何提高紫花苜蓿在逆境环境下的产量已成为研究热点之一，共生微生物对其适应逆境胁迫有重要影响，可以作为缓解压力以提高作物产量和条件的替代来源，是植物基因组的有效延伸，根瘤菌在与豆科植物长期互作过程中，形成了一种稳定的共生固氮体系，通过向植物提供固定氮增加生物量、刺激植物产生抗氧化酶等多种机制诱导，直接或间接刺激植物生长，但是，过高的NaCl也会影响细菌在植物根系的定殖及互作，近几年有研究发现，多糖类物质在诱导植物抗逆性方面有很好的利用价值，是一种非常具有应用前景的农业生物材料。

EPS是一些特殊微生物细胞相关或细胞外分泌的高分子量聚合物，通常在恶劣环境或营养条件下产生，且与非生物胁迫之间存在正相关关系，其作为一种生理应激反应和应对环境的保护策略，对细菌的生长、定殖和抗逆等均有重要意义，EPS具有丰富的官能团，使酸性EPS沉淀金属阳离子和产生介导的耐酸性和耐铝能力，还可以提供抗氧化剂、储存碳及促进植物生长的营养物质，对植物种子萌发、生长和抗逆性具有较好的促进作用，除此之外，在共培养实验中，产EPS的重金属抗性菌株对不产生EPS的重金属敏感菌株有保护作用，称之为“拯救”非耐药菌株，这也意味着更强的能力与其他土壤微生物及寄主植物共生，对微生物生态及苜蓿生产产生影响，桃色欧文氏菌(Erwiniapersicina)是一种典型的革兰氏阴性细菌(Gramnegative，G-)，其编号Cp2菌株可在金氏B培养基上能产生大量生黏液状EPS，且广泛存在于自然环境中，但关于Cp2-EPS对植物抗逆性的研究知之甚少。

植物对盐的耐受性主要以包括形态、生理和生化变化反应出来，其中，种子萌发和苗期生长是植物生长发育的基础，也是最脆弱的环节，因此，本试验以外援添加Cp2-EPS和根瘤菌联合接种，探究其对紫花苜蓿在盐胁迫下种子萌发和苗期生长的影响，本研究结果将增强我们对根瘤菌和EPS联合接种促进植物盐胁迫抗性的机制理解，并为紫花苜蓿提质增产提供理论依据，为世界盐碱地修复提供新策略。

发明内容

本发明的目的在于提供一种提高紫花苜蓿耐盐的方法，以解决盐渍化土地面积日益增加，盐度会降低土壤微生物多样性和相对丰度，对微生物和植物间相互作用产生不利影响技术问题。

本发明为解决上述技术问题，采用以下技术方案来实现：

一种提高紫花苜蓿耐盐的方法，包括：

S1、供试菌株、Cp2-EPS及紫花苜蓿品种