[发明专利]牛源化CRISPR/boCas13a基因编辑系统、方法及应用有效
| 申请号： | 202310522486.4 | 申请日： | 2023-05-10 |
| 公开（公告）号： | CN116286904B | 公开（公告）日： | 2023-08-01 |
| 发明（设计）人： | 杨磊;郝振廷;白春玲;刘雪霏;苏广华;李光鹏 | 申请（专利权）人： | 内蒙古大学 |
| 主分类号： | C12N15/55 | 分类号： | C12N15/55;C12N15/113;C12N15/85 |
| 代理公司： | 北京华清迪源知识产权代理有限公司 11577 | 代理人： | 朱芳 |
| 地址： | 010000 内蒙古自*** | 国省代码： | 内蒙古;15 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 牛源化 crispr bocas13a 基因 编辑 系统 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1. 一种牛源化CRISPR/boCas13a基因编辑系统，其特征在于，包括boCas13a蛋白和crRNA；编码所述boCas13a蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述crRNA的序列如SEQID NO.4-10中的任一种；所述牛源化CRISPR/boCas13a基因编辑系统的靶基因为MSTN、FTO、CD44、ACADSB、PRNP、LDLR或HEBP1。
2.利用权利要求1所述的牛源化CRISPR/boCas13a基因编辑系统进行基因编辑方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）分别构建boCas13a表达载体和crRNA表达载体；
（2）将所述boCas13a表达载体和crRNA表达载体共转染牛源细胞；
（3）对牛源细胞靶基因的切割效率进行检测。
3.根据权利要求2所述的基因编辑方法，其特征在于，将所述boCas13a基因序列构建在pLWCas13a载体上，获得pboCas13a表达载体。
4.根据权利要求2所述的基因编辑方法，其特征在于，
采用Real-Time qPCR法进行切割效率检测。
5.权利要求1所述的牛源化CRISPR/boCas13a基因编辑系统在编辑牛源细胞RNA中的应用。
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