[发明专利]含油茶皂素的抑制剂的制备方法及其在抑制蜡样芽孢杆菌催吐毒素表达中的应用

说明书

本发明公开一种含油茶皂素的抑制剂的制备方法及其在抑制蜡样芽孢杆菌催吐毒素表达中的应用，涉及抑制剂技术领域，该种含油茶皂素的抑制剂的制备方法包括S1、提取油茶皂素：S2、提取柠檬提取物、柚子皮提取物和蒲公英提取物；S3、复配：将S1中的油茶皂素、柠檬提取物、柚子皮提取物、蒲公英提取物和苯甲酸钠进行混合制备抑制剂，其中油茶皂素的质量浓度为85％‑95％，柠檬提取物、柚子皮提取物和蒲公英提取物的质量浓度为2％‑10％，苯甲酸钠的质量浓度为0.1％‑0.2％；采用本申请提供的制备方法获得的抑制剂对蜡样芽孢杆菌具有明显的生长抑制作用；采用本申请提供的制备方法获得的抑制剂能够抑制蜡样芽孢杆菌催吐毒素的表达。

技术领域

本发明涉及抑制剂领域技术，尤其是指一种含油茶皂素的抑制剂的制备方法及其在抑制蜡样芽孢杆菌催吐毒素表达中的应用。

背景技术

蜡样芽孢杆菌作为食源性致病菌常引发公共卫生事件，其可对多种类型食物,如肉类、汤类、蔬菜、乳制品和海鲜等,引起食物中毒事件，蜡样芽孢杆菌引起的食物中毒主要分为腹泻型和催吐型；催吐型食物中毒主要是由ces等基因簇阳性蜡样芽孢杆菌产生催吐毒素引起的,该型食物中毒症状常较为严重,甚至导致死亡，为此食品安全引起人们广泛关注。

目前人们更多采用抗生素等药物，现有研究表明，含氯消毒剂，如次氯酸钠、季铵盐等，与高压水清洗联用，尚不能有效清除蜡样芽孢杆菌，且易损伤食品原料，产生消毒剂残留，增加微生物耐药风险。

基于上述技术问题，本申请通过采用含油茶皂素的抑制剂，抑制蜡样芽孢杆菌同时抑制蜡样芽孢杆菌催吐毒素的表达。

发明内容

有鉴于此，本发明针对现有技术存在之缺失，其主要目的是提供一种含油茶皂素的抑制剂的制备方法及其在抑制蜡样芽孢杆菌催吐毒素表达中的应用，其通过采用本申请提供的制备方法获得的抑制剂对蜡样芽孢杆菌具有明显的生长抑制作用，而且抑制作用在一定浓度范围内呈现一定的剂量关系；采用本申请提供的制备方法获得的抑制剂能够抑制蜡样芽孢杆菌催吐毒素的表达。

为实现上述目的，本发明采用如下之技术方案：

一种含油茶皂素的抑制剂的制备方法，其包括如下制备步骤：

S1、提取油茶皂素：将油茶饼柏粉碎处理后过20目筛，向过筛后的油茶饼柏粉末加入蒸馏水加热回流提取，将提取后的物质进行浓缩干燥得到粗提取物，将粗提取物溶于水后经大孔树脂柱洗脱分离收集油茶皂素；

S2、提取柠檬提取物、柚子皮提取物和蒲公英提取物；分别称取等量的柠檬干、柚子皮和蒲公英混合后粉碎，过20目筛，将粉碎后的混合物加入水进行提取，在提取时加入酶制剂，将提取物调节pH后采用体积浓度为70％-85％的乙醇加热回流提取，将提取液浓缩干燥后的得到柠檬提取物、柚子皮提取物和蒲公英提取物；

S3、复配：将S1中的油茶皂素、柠檬提取物、柚子皮提取物、蒲公英提取物和苯甲酸钠进行混合制备抑制剂，其中油茶皂素的质量浓度为85％-95％，柠檬提取物、柚子皮提取物和蒲公英提取物的质量浓度为2％-10％，苯甲酸钠的质量浓度为0.1％-0.2％。

作为一种优选方案：所述S1中油茶饼柏质量与加入蒸馏水体积的料液比为1:8-1:10。

作为一种优选方案：所述S1中蒸馏水油茶饼柏的提取温度为80-90℃，提取时间为3-4h，提取次数为2-3次。

作为一种优选方案：所述S1中经大孔树脂柱洗脱分离收集油茶皂素的条件为：先用蒸馏水和体积浓度为15％的乙醇溶液洗脱杂质，然后依次分别用体积浓度为65％、70％、75％和80％的乙醇溶液进行梯度洗脱，分别收集洗脱液，经高效液相色谱仪分析检测后合并含有油茶皂素的洗脱液，将洗脱液浓缩干燥得到茶油皂素。

作为一种优选方案：所述体积浓度为65％、70％、75％和80％的乙醇溶液的体积加入量均为粗提取物体积的20倍量。