[发明专利]一种梨多酚氧化酶PpyPPO4基因在审
| 申请号： | 202310675455.2 | 申请日： | 2023-06-08 |
| 公开（公告）号： | CN116555295A | 公开（公告）日： | 2023-08-08 |
| 发明（设计）人： | 范净;胡红菊;陈启亮;杨晓平;张靖国;杜威 | 申请（专利权）人： | 湖北省农业科学院果树茶叶研究所 |
| 主分类号： | C12N15/53 | 分类号： | C12N15/53;C12N9/02;C12N15/82;A01H5/08;A01H6/74 |
| 代理公司： | 深圳峰诚志合知识产权代理有限公司 44525 | 代理人： | 陈婷 |
| 地址： | 430072 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 梨多酚 氧化酶 ppyppo4 基因 | ||
1.一种梨多酚氧化酶PpyPPO4基因，其特征在于，所述的基因的全长核酸序列如SEQ IDNo.1所示的核苷酸序列，并包含1764bp的开放阅读框和编码587个氨基酸。
2.根据权利要求1所述的一种梨多酚氧化酶PpyPPO4基因，其特征在于：所述的编码587个氨基酸序列如序列表SEQ ID No.2所示的截断片段核苷酸序列。
3.根据权利要求1所述的一种梨多酚氧化酶PpyPPO4基因，其特征在于：根据所述的基因全长序列设计VIGS正向引物VIPPO4-XbaI-F和反向引物VIPPO4-BamHI-R。
4.根据权利要求3所述的一种梨多酚氧化酶PpyPPO4基因，其特征在于：所述的正向引物VIPPO4-XbaI-F的序列为5’-AGGTTACCGAATTCTCTAGAACCACCCTCTTCCGCTCT-3’。
5.根据权利要求3所述的一种梨多酚氧化酶PpyPPO4基因，其特征在于：所述的反向引物VIPPO4-BamHI-R的序列为5’
-CGTGAGCTCGGTACCGGATCCGTCTGGAAGTGCCCGCAT-3’。
6.一种利用梨多酚氧化酶PpyPPO4基因制成侵染砂梨果实的方法，其特征在于：包括以下步骤：
S1、根据所述的基因全长序列为引物，并用PCR扩增基因截断序列，截断序列的长度为441bp，其序列如SEQ ID No.3所示的基因截断序列；
S2、将基因截断序列与pTRV2-VIGS载体相连，构建pTRV2-PpyPPO4-VIGS载体；
S3、将pTRV1与pTRV2-PpyPPO4-VIGS载体1∶1混合制成侵染砂梨果实。
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